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- 百奥莱博
- SY0033-WUH
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
101
- 英文名：
Hot Start DNA Polymerase
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
250U
特别提示：包括热启动DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：热启动DNA聚合酶
英文名称：Hot Start DNA Polymerase
产品货号：SY0033
产品规格：250U
Hot Start DNA Polymerase(HS DNA Polymerase)是经过化学修饰的热稳定重组型Taq DNA Polymerase，在室温下活性被完全封闭，只有经过95℃加热后活性才被释放，可防止在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增和引物二聚体。与基于抗体的热启动Taq酶相比，化学修饰的Hot Start DNA Polymerase活性封闭更彻底，严谨性更高；与现有化学修饰的热启动Taq酶相比，Hot Start DNA Polymerase的激活时间只需要5分钟，兼容现有的PCR程序。
Hot Start DNA Polymerase的反应缓冲液中的组分、浓度都经过优化，使得引物与模板结合的严谨性提高，从而zuì大程度的减少非特异扩增和引物二聚体，非常适合于从复杂模板(基因组，cDNA)中扩增低拷贝基因。PCR产物3’端带A，可克隆至T载体。另外，产品中提供的PCR Enhancer可有助于高GC含量片段的扩增。
产品组分：
10×HS PCR Buffer(with 20 mM MgCl2)：1.25ml
25 mM MgCl2：1ml
dNTP Mix(10 mM each)：200μl
Hot Start DNA Polymerase(5 U/μl)：50μl
5×PCR Enhancer：500μl
10×Loading buffer：1.25ml
活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃ 30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
质量控制
核酸外切酶残留检测：10U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：10U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50μl体系中，加入2U本品，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测：PCR体系中加入1.25U本品，以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。35个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的360 bp条带。
引物设计注意事项
1）引物3’端zuì后一个碱基zuì好为G或者C；
2）引物3’端zuì后8个碱基应避免出现连续错配；
3）引物3’端尽量避免发夹结构出现；
4）引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5）引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
6）引物的GC含量控制在40%-60%之间；
7）正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。
除了热启动DNA聚合酶,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN91106 | T7体外转录试剂盒 | 50次 |
| WE0106 | 2×BAmp MasterMix(含染料) | 5ml |
| WE0136 | SuperSYBR Mixture(不含ROX校正染料) | 1ml|5ml |
| ALH253 | 长片段Taq PCR MasterMix | 0.5ml|5ml |
| ALH233 | 长片段Taq DNA聚合酶 | 500U|3000U |
| ALH268 | 耐热第一链反转录PCR试剂盒 | 20μl×25次|20μl×50次 |
| SY0037 | 即用型PCR预混溶液 | 1ml |
| SY0052 | 腺苷三磷酸溶液(100 mM)(ATP) | 1ml |
| MT0023 | 2×Strong Taq PCR Mix(含染料) | 1ml|5ml|500ml |
| MT0025 | 超保真DNA聚合酶 | 250U|2500U |
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文献和实验对于 Taq 酶扩增性能更强。 1. 选择热启动酶降低非特异性扩增 在使用 Taq 酶进行扩增时，有时会出现非特异性扩增，可能的原因可以从模板、引物、体系、程序中一一排查。如模板是否被污染，引物特异性如何，Mg2+浓度偏高等等，其中一个不可忽视的原因是 DNA 聚合酶的种类是否合适。如果排查了其它原因仍旧有非特异性产物，可以选择热启动酶重新实验，即可有效减少或消除体系中其它产物的积累。常用的热启动酶分为两类：一类是化学法修饰的热启动酶，如 Ace Taq ，预变性 95℃5 - 10 min 即可
Polymerase Chain Reaction--热启动PCR
This procedure is a "hot start" PCR cycle for use with large primers. PCR mass-produces DNA contained in the source plasmid between the two primer-binding sequences, eventually producing linear DNA starting with Primer 1, continuing
相关专题 重组DNA技术工具酶 定义 DNA聚合酶 (DNA polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶。 DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。 DNA聚合酶 的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。 真核细胞有5种DNA聚合酶，分别为DNA聚合酶α(定位于胞核
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