2×Pfu PCR MasterMix哪里卖

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括2×Pfu PCR MasterMix哪里卖在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：2×Pfu PCR MasterMix哪里卖
规格：1ml×5
编号：JN0031
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
  本制品是将PCR反应所需的Pfu酶、dNTP、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂以及稳定剂，预先配制成2倍浓度的混合物。2×Pfu PCR MasterMix专为扩增克隆DNA片段优化，高保真，错误率仅为1.3×10-6。使用 时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，非常方便。用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。

产品特点：
高保真：Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶，其保真度为普通Taq酶的10倍
灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段（图例一）
快捷：PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应
便利：10μl，25μl 或50μl体系全部适用

使用建议：
Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3´端"A"突出，其PCR产物的克隆有几种方案。
1、PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中（参见实验方案）。
2、将产物3´末端加A后再与T载体连接（参见实验方案）。
3、引物中引入15bp与载体同源序列，利用BalbRec PCR产物一步定向无缝克隆试剂盒（Cat# JN0001）直接连接到目的载体。
由于Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3´端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3´→5´外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并最后加入Pfu酶。

应用实例：

图例一）50μl 扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模板，可对特定基因片段（380bp）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；泳道M：DNA Ladder 2000

常用反应体系(50μl)：

 

组分	体积
2×PCR MasterMix*	25μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
模板	1-50ng(质粒)
	10ng-1μg(基因组)
ddH2O	至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

常用PCR循环：

当扩增片段＜3K：
94℃	1分钟30秒
30次循环	94℃，30秒 57℃，30秒 72℃，根据产物长度调整，60秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温
当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：
94℃	20秒
30次循环	94℃，5秒 68℃，根据产物长度调整，60秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温

PCR MasterMix选购指南：

编号	产品名称	特点
适用于菌落鉴定、菌液鉴定及常规PCR鉴定实验的Mix系列
JN0030	2×Taq PCR MasterMix	高性价比PCR Mix，使用简便，扩增灵敏度高
JN0034	2×Complex Taq PCR MasterMix	JN0030改进版，性能更均衡，适用面更广
JN0040	2×Fast Taq PCR MasterMix	最快速的PCR试剂，常规PCR鉴定45分钟内知道结果
JN0035	2×RoomTop Taq PCR MasterMix	可放在手边的PCR试剂，室温稳定存放60天
JN0036	2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix	室温稳定存放60天，高速PCR试剂，常规PCR鉴定45分钟内知道结果
适用于一些较难扩增的PCR条带的鉴定及短片段克隆
JN0032	2×Taq Plus PCR MasterMix	扩增效率更高及较好的保真度
JN0038	2×Hot Start Taq PCR MasterMix	采用热启动Taq，可获得很好的特异性
JN0041	2×Ultra Taq PCR MasterMix	高速扩增酶，优化配方，解决PCR扩增难题的，灵敏度高
高保真酶试剂，适用于长片段基因克隆
JN0031	2×Pfu PCR MasterMix	采用高保真酶，适用于基因克隆
JN0043	2×Fast Pfu PCR MasterMix	采用改良型高保真酶，更好的扩增效果，4倍扩增速度；扩增迅速
防止PCR产物二次污染、极高检测灵敏度的PCR试剂
JN0047	2×PCR MasterMix(防污染)	采用dUTP/UDG酶系统，从根本上杜绝PCR产物二次污染
JN0033	2×Genotyping PCR Kit（nomal）	极高检测灵敏度，可达到普通PCR试剂102至104倍扩增灵敏度

PCR MasterMix性能对比表：

名称	编号	扩增时间	扩增长度	是否有3"-A	基因组扩增
2×Taq PCR MasterMix	JN0030	1min/kb	≤8kb	√	+
2×RoomTop Taq PCR MasterMix	JN0035	1min/kb	≤8kb	√	++
2×Complex Taq PCR MasterMix	JN0034	1min/kb	≤8kb	√	+
2×Fast Taq PCR MasterMix	JN0040	15s/kb	≤8kb	√	+
2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix	JN0036	15s/kb	≤8kb	√	++
2×Ultra Taq PCR MasterMix	JN0041	15s/kb	≤8kb	√	+++
2×Taq Plus PCR MasterMix	JN0032	1min/kb	≤20kb	√	++++
2×Ultra Taq Plus PCR MasterMix	JN0042	15s/kb	≤30kb	√	++++
2×Hot Start Taq PCR MasterMix	JN0038	1min/kb	≤8kb	√	++++
2×Hot Start Taq Plus PCR MasterMix	JN0039	1min/kb	≤20kb	√	++++
2×Pfu PCR MasterMix	JN0031	1min/kb	≤6kb	×	+
2×Fast Pfu PCR MasterMix	JN0043	30min/kb	≤12kb	×	+
2×SYBR Green Realtime PCR MasterMix	JN0049	1min/kb	≤8kb	√	++
2×Genotyping PCR Kit（Normal）	JN0033	1min/kb	≤8kb	√	+++++
2×Genotyping PCR Kit（Fast）	JN0044	15s/kb	≤8kb	√	+++++
2×PCR MasterMix(防污染)	JN0047	1min/kb	≤8kb	√	+

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·重组人TNFRSF1A
编号：JN0471
英文名称：Recombinant Human Tumor Necrosis Factor Receptor I
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成，目的基因编码的Ile22-Thr211在N端含有His标签。

TNFRSF1A质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)

TNFRSF1A制剂：冻干品

TNFRSF1A保存：
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存，室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4～7℃保存2～7天，可分装后置于-20℃保存三个月。

TNFRSF1A复溶：
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后，请根据用量分装冻存，避免反复冻融。

关于TNFRSF1A：
Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A (Tnfrsf1a) is a member of the tumor necrosis factor receptor superfamily. Tnfrsf1a is one of the major receptors for the tumor necrosis factor-alpha. It can activate the transcription factor NF-κB, mediate apoptosis, and function as a regulator of inflammation. Antiapoptotic protein BCL2-associated athanogene 4 (BAG4/SODD) and adaptor proteins TRADD and TRAF2 have been shown to interact with this receptor, and thus play regulatory roles in the signal transduction mediated by the receptor. Germline mutations of the extracellular domains of this receptor were found to be associated with the human genetic disorder called tumor necrosis factor associated periodic syndrome (TRAPS) or periodic fever syndrome


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·重组人NCR3(天然细胞毒性触发受体3)
编号：JN0538
英文名称：Recombinant Human Natural Cytotoxicity Triggering Receptor 3
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成，目的基因编码的Leu19-Thr138在C端含有His标签。

NCR3质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)

NCR3制剂：冻干品

NCR3保存：
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存，室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4～7℃保存2～7天，可分装后置于-20℃保存三个月。

NCR3复溶：
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后，请根据用量分装冻存，避免反复冻融。

关于NCR3：
Natural Cytotoxicity Triggering Receptor 3 (NCR3) along with NKp44 and NKp46 constitute a group of receptors termed “Natural Cytotoxicity Receptors”. They play a major role in triggering NK-mediated killing of most tumor cells lines. NKp30 is a type I transmembrane protein having a single extracellular V-like immunoglobulin domain. NKp30 is selectively expressed both in resting and activated human NK cells. In addition, NKp30 is also involved in NK-mediated induction of dendritic cell (DC) maturation. It has been demonstrated that NK cell activation signaling specifically induces lytic activity against several tumor cell types and synthesis of new NF-κB dependent proteins during the initiation of cytotoxicity.


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·DNA凝胶回收试剂盒
编号：JN0131
规格：50次
  本试剂盒采用温和的溶胶液，可以使琼脂糖凝胶完全融化，同时避免在高温下DNA发生脱嘌呤和末端水解，保持DNA完整的生物学活性。采用硅胶膜选择性吸附DNA的方法回收DNA，适合从TAE或者TBE琼脂糖凝胶中纯化回收多至4μg，长度介于50bp-10kb的DNA片段，回收率为90%.。纯化回收的DNA可直接酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。

试剂盒组成：

组份	规格
Binding Buffer	40ml
Wash Buffer	15ml
Elution Buffer	10ml
DNA纯化柱	50个

注意事项：
1、Wash Buffer在使用前按照试剂瓶所示体积加入无水乙醇，混合均匀。
2、Buffer GL在较低温度下易沉淀，若出现沉淀，使用前请在37℃加热几分钟，至沉淀溶解后再使用。
3、建议使用TAE电泳分离DNA，因为TBE中的硼*(代"酸")与琼脂糖生成非共价结合的四羟基硼*(代"酸")盐复合物而降低DNA回收率。
4、尽量减少紫外照射的时间，以免损伤DNA。
5、水浴期间要间断性摇晃离心管，加速溶胶进行下一个步骤，减少DNA回收率的降低。

操作步骤：
1、将切割的凝胶转入预先称重的1.5ml离心管中，加入等体积的Buffer GL(100mg的凝胶加入100μl Buffer I)。放入55-60℃水浴中，间断摇晃混合，直至凝胶完全融化（约5-10min），放置使其冷却至室温。
2、将上述混合液加入DNA回收柱内，如果溶液体积>700μl，分次转移溶液；室温放置1-2min或更长时间。
3、在13000g离心1分钟，弃废液。目的DNA长度≤500bp时，离心结束后将收集管中的溶液再次转入DNA纯化柱中，离心。
4、在DNA纯化柱中加入650μl Wash Buffer，13,000g离心30秒，弃废液，将DNA纯化柱放回收集管。
5、重复步骤4。
6、13000g离心3 min，以去除柱中残余乙醇。
7、将纯化柱放入新的离心管中，向柱中加入在60℃下预热的30-50μl Elution Buffer或ddH2O，室温放置1-2min或更长时间。
注意：
a. 加入Elution Buffer后将柱子整个温育5min后再离心洗脱可以增加DNA回收效率。
b. 对大于8Kb的片段，加溶液Elution Buffer后将柱子整个温育15-30min可以提高回收效率。
8、13,000g离心1 min，所得液体即为高纯度DNA。

储存条件：室温，有效期12个月。

我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购2×Pfu PCR MasterMix哪里卖。