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上海晶抗生物工程有限公司
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-20℃
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5ml
异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷简称IPTG,分子式为C9H18O5S,分子量为238.30
CAS号为367-93-1。IPTG是一种作用极强的诱导剂,不易被细菌代谢而且很稳定。基于这个特性,当携带带lacZ 基因载体DNA以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可根据是否呈现蓝/白色菌落(或噬菌斑)判断出基因重组体。此外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。
自备材料:
1、 琼脂培养基
2、 氨苄青霉素溶液
3、 培养箱、培养皿
操作步骤(仅供参考):
1、 在琼脂培养基中,加入Amp、IPTG、X-Gal,冷却制成培养基平板,转化、培养。
2、 可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。
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文献和实验Ampicillin (50mg/ml) Ampicillin Dissolve Ampicillin (Na salt from Sigma, A-9518) in H2 0. Store 1 ml aliquots at 20o C in common freezer for stock solutions 上一篇:PREPARATION
表达材料: ( 1 ) LB (Luria—Bertani))培养基: 酵母膏 (Yeast extract) 5g 蛋白胨 (Peptone) 10g NaCl 10g 琼脂 (Agar) 1-2% 蒸馏水 (Distilled water) 1000ml pH 7.0 适用范围:大肠杆菌 ( 2 ) IPTG 贮备液: 2 g IPTG溶于10 mL 蒸馏水中,0 . 22 μm 滤膜过滤除菌,分装成1 mL /份,-20 ℃ 保存
载体操作中最常用的几个概念: 1. The lac Z gene may be used as a simple "reporter" gene, separated from its natural promoter. For example, we might put the lac Z gene in front of a mammalian promoter
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