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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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产品简介:
酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase)。每一种酯酶常能水解许多不同的底物,多种不同的酯酶又能水解相同的底物,因此这一系列酯酶被称为非特异性酯酶。非特异性酯酶的适pH为5.0~8.0,定位于溶酶体和内质网,在肝脏、肾脏、胰和小肠具有较高的酶活性。单核-吞噬细胞系统的单核巨噬细胞、树突细胞也含有丰富的非特异性酯酶。
酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)又称非特异性酯酶染色液,其原理是酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚,α-萘酚再与六偶氮副品红偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于细胞质。本染色液对酯酶染色无特异性,故又称作非特异性酯酶染色液,可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色,亦可作抑制试验。该染色液仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)
注意事项:
血液或骨髓细胞涂片应新鲜,薄厚适宜,一般2天内染色,否则会影响酶的活性。
ANAE孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
ANAE孵育液配制后易出现浑浊,但不会影响染色效果。
单核细胞为中度阳性至强阳性,对NaF敏感。正常粒细胞呈阴性反应。
每次染色时,应有阳性对照片。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验α醋酸萘酯水解成醋酸和α萘酚,后者与六偶氮副品红偶联,生成不溶性的红色沉淀物,沉积在T淋巴细胞胞浆内酯酶所在的部位,经甲基绿复染,反应呈现单一或散在的颗粒或斑块,显棕红色。B淋巴细胞则无此种反应。因此ANAE染色法可作为鉴别T淋巴细胞的一种非特异性方法。此外,单核细胞、中性粒细胞、酸性粒细胞及血小板等也可呈现酯酶染色阳性反应,应当注意区分。 实验试剂 1. 25%戊二醛溶液(固定液) 在0.1mol/L pH值7.4磷酸
问:谁有a一醋酸萘酯酶(ANAE)染色法的具体步骤,我们这里查不到,还望各位大侠不吝赐教!答:中性非特异性脂酶(α—NAE)染色[方法学] 酯酶染色的方法很多,根据与pH底物等不同作用,将常用的酯酶染色法分为两大类,即特异性酯酶染色和非特异性酯酶染色。后者又可分为3类:①中性非特异性酯酶染色法:α—乙酸菜酚酯酶、乙酸菜酚酯酶和乙酸菜酚AS-D酯酶。②酸性非特异性酯酶染色法:α—乙酸菜酯酶和α—丁酸菜酯酶。②碱性非特异性酯酶染色法:α—丁酸菜酯酶。中性非特异性酯酶染色是单核细胞与粒细胞白血
一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质;第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来,操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清(兔抗鸡血清)。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:60mmol/L,pH
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