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12个月
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上海晶抗生物工程有限公司
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-20℃
- 规格:
100ml
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其适温度约为37℃。
自备材料:
PBS、Hanks液或无血清培养液
显微镜
离心机
注意事项:
尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
在Trypsin-EDTA solution过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
Trypsin-EDTA solution消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
组织块则为0.1%或0.125%。 实验材料与用品: ***材料:3 000 mL锥形瓶,25 mL、50 mL试剂瓶,500 mL输液瓶,螺口盖,翻帽塞,pH试纸,孔径0.22μm的微孔滤膜。 ***药品:NaCl,Na2HP04,KH2P04,KCl,酚红,NaHC03,胰蛋白酶干粉,0.02%EDTA ,CaCl2,D-葡萄糖,MgCh·6H20,MgS04·7H20,酚红(0.1%)(配法:称酚红2 g,置于研磨器中,先用数滴5.6%的NaHCO3溶液溶解并研磨,再加
实验材料: 1. 细胞来源:新生儿包皮; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液:两者比例为1:1,用D-Hanks液配制; 4. 0.02%大豆胰蛋白酶抑制剂:用DMEM培养液配制; 5. 生长基质:人纤维连接蛋白,按10μg/cm2 包被培养皿; 6. DMEM培养液:DMEM培养基,加10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100
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