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- 保存条件:
—20℃,12个月
- 库存:
大量供应
- 供应商:
上海研谨生物
- 规格:
100ml
产品简介:
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化
更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其最适温度约为 37℃。
研谨生物Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚红)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、
少量酚红等组成,经过滤除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下 1~2min 左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
产品组成:
Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚红) 100ml -20℃
自备材料:
1、 PBS、Hanks 液或无血清培养液
2、 显微镜
3、 离心机
| 货号 | 规格 | 市场价 | 货期 | 其它 |
| R20104-100ml | ¥90元 | 2-3天 |
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min,
不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量
去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1、 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。3、Trypsin-EDTA solution 消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 个月有效。
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文献和实验问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
组织块则为0.1%或0.125%。 实验材料与用品: ***材料:3 000 mL锥形瓶,25 mL、50 mL试剂瓶,500 mL输液瓶,螺口盖,翻帽塞,pH试纸,孔径0.22μm的微孔滤膜。 ***药品:NaCl,Na2HP04,KH2P04,KCl,酚红,NaHC03,胰蛋白酶干粉,0.02%EDTA ,CaCl2,D-葡萄糖,MgCh·6H20,MgS04·7H20,酚红(0.1%)(配法:称酚红2 g,置于研磨器中,先用数滴5.6%的NaHCO3溶液溶解并研磨,再加
实验材料: 1. 细胞来源:新生儿包皮; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液:两者比例为1:1,用D-Hanks液配制; 4. 0.02%大豆胰蛋白酶抑制剂:用DMEM培养液配制; 5. 生长基质:人纤维连接蛋白,按10μg/cm2 包被培养皿; 6. DMEM培养液:DMEM培养基,加10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100
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