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- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
—20℃,12个月
- 库存：
大量供应
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
100ml
产品简介：
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后，小肠内的肠肽酶会活化该酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶，能够继续活化
更多胰蛋白酶原，这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作，它会将蛋白质水解为肽，进而分解为氨基酸，其最适温度约为 37℃。
研谨生物Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚红)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、
少量酚红等组成，经过滤除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化，通常室温下 1～2min 左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
产品组成：
Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚红) 100ml -20℃
自备材料：
1、 PBS、Hanks 液或无血清培养液
2、 显微镜
3、 离心机
| 货号 | 规格 | 市场价 | 货期 | 其它 |
| R20104-100ml | ￥90元 | 2-3天 |
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min，
不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量
去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项：
1、 尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染。3、Trypsin-EDTA solution 消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 个月有效。
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文献和实验问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用！多谢！答：1、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。如果对贴壁没
动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
组织块则为0.1%或0.125%。 实验材料与用品： ***材料：3 000 mL锥形瓶，25 mL、50 mL试剂瓶，500 mL输液瓶，螺口盖，翻帽塞，pH试纸，孔径0.22μm的微孔滤膜。 ***药品：NaCl，Na2HP04，KH2P04，KCl，酚红，NaHC03，胰蛋白酶干粉，0.02%EDTA ，CaCl2，D-葡萄糖，MgCh·6H20，MgS04·7H20，酚红(0.1%)(配法：称酚红2 g，置于研磨器中，先用数滴5.6%的NaHCO3溶液溶解并研磨，再加
实验材料： 1. 细胞来源：新生儿包皮； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液：两者比例为1：1，用D-Hanks液配制； 4. 0.02%大豆胰蛋白酶抑制剂：用DMEM培养液配制； 5. 生长基质：人纤维连接蛋白，按10μg/cm2 包被培养皿； 6. DMEM培养液：DMEM培养基，加10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100
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