Western抗体洗脱液(酸性)

Western Stripping buffer(酸性)主要依靠酸性来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失， 适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用，尤其适用于PVDF膜，其次为硝酸纤维素膜。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB，NBT/BCIP)不适用于本试剂。
 
Western抗体洗脱液(Stripping buffer)又称膜再生液或Western一抗二抗去除液，用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping buffer可以洗脱一抗二抗，非常方便地重新利用使用过的膜，检测其它蛋白。 Stripping buffer多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱不宜重复利用膜，一般可以利用2～4次。

自备材料：
1、 蒸馏水
2、 摇床
3、 (可选)滤纸
4、 Western封闭液
 
操作步骤(仅供参考)：
1、在膜完成Western化学发光检测后，蒸馏水中漂洗5min。
2、弃蒸馏水，加入Western Stripping buffer，完全覆盖住膜。
3、摇床上漂洗30～60min。
4、弃液，尽量把Western Stripping buffer去除干净，必要情况下，可以用滤纸吸干。
5、加入TBS、TBST或PBS振荡漂洗3～4次，每次在摇床上漂洗3～5min。
6、入封闭液进行封闭，进行Western后续操作。
 
注意事项：
使用辣根过氧化物酶标记的抗体时，封闭液必须使用5%脱脂奶粉配制。使用碱性磷酸酯酶标记的抗体时，封闭液必须使用酪蛋白(casein)配制。
Western Stripping buffer(酸性)特别适用于PVDF膜的再生，硝酸纤维素膜的再生效果不如PVDF膜。
Western Stripping buffer(酸性)适用于ECL等类似的化学发光液的检测后的一抗二抗洗脱。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB，NBT/BCIP)不适用于本试剂。
Western Stripping buffer(酸性)有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。