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大量
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6个月
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件:
RT 避光
- 规格:
100ml
产品简介:
Western抗体洗脱液(Stripping buffer)又称膜再生液或Western一抗二抗去除液,用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping buffer可以洗脱一抗二抗,非常方便地重新利用使用过的膜,检测其它蛋白。 Stripping buffer多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱不宜重复利用膜,一般可以利用2~4次。
Western Stripping buffer(酸性)主要依靠酸性来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失, 适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用,尤其适用于PVDF膜,其次为硝酸纤维素膜。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。
Western抗体洗脱液(酸性)
操作步骤(仅供参考):
1、在膜完成Western化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5min。
2、弃蒸馏水,加入Western Stripping buffer,完全覆盖住膜。
3、摇床上漂洗30~60min。
4、弃液,尽量把Western Stripping buffer去除干净,必要情况下,可以用滤纸吸干。
5、加入TBS、TBST或PBS振荡漂洗3~4次,每次在摇床上漂洗3~5min。
6、入封闭液进行封闭,进行Western后续操作。
Western抗体洗脱液(酸性)
注意事项:
使用辣根过氧化物酶标记的抗体时,封闭液必须使用5%脱脂奶粉配制。使用碱性磷酸酯酶标记的抗体时,封闭液必须使用酪蛋白(casein)配制。
Western Stripping buffer(酸性)特别适用于PVDF膜的再生,硝酸纤维素膜的再生效果不如PVDF膜。
Western Stripping buffer(酸性)适用于ECL等类似的化学发光液的检测后的一抗二抗洗脱。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。
Western Stripping buffer(酸性)有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验相关专题 老板说节约实验经费,试剂溶液能自己配置的就都自己配置,不买没必要的试剂。下面是我们实验室用的抗体洗脱液配方:主要是参考了分子 克隆那本实验室宝典。 抗体洗脱液配方 100mmol/L 2-Mercaptoethanol,2%SDS,62.5m mol/L Tris·HCl pH6.8 14.4 mol/L 2- Mercaptoethanol(β-巯基乙醇) 700 ml(通风厨里加) SDS
植物从环境中吸收离子时,具有选择吸收的特性,表现在对同一溶液中的不同离子,甚至同一种盐的阳离子和阴离子的吸收量不同。例如硫酸铵[( NH4 ) 2 SO4 ],由于植物对氮的需要量大于硫,因此,大量吸收 NH4 使溶液中剩余较多的 SO2-4 。同时植物在吸收 NH4 时,是与细胞表面的 H 进行交换,所以溶液中 H 增加, pH值降低。硫酸铵在化学上是中性盐,但由于植物选择吸收生理活动的结果,使介质酸性增加,所以称为生理酸性盐。相反,有些化学上的中性
通常是指 pH低于 5的酸性水的湖泊。含有硫酸等无机酸的无机酸性湖泊,存在于火山或硫磺泉附近(在日本有恐山湖、磐梯五色湖等)。而含有腐植酸或不饱和腐植酸的有机酸性湖( organic acidotro-phic lake)则大多存在于高湿原地带,溶有大量有机物,也属于腐植营养湖。泻湖(日本宫城县)的酸度( pH=1.4)是世界上最强的酸性湖。无机酸性湖不仅酸性强而且还含有大量的铁,生物的种类一般较少,但特殊种的数量却相当多。在 pH值达到 2.6的湖中还可见到大型植物芦苇
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