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标本溶血:
1、脱水、休克等疾病使得穿刺困难而溶血;
2、抽血器质量不合格导致溶血;
3、血清分离不当导致溶血;
4、红细胞有先天或获得性缺陷而易破坏溶血;
5、患溶血性疾病。
溶血的干扰机理:
1、血细胞中浓度远高于血清浓度:血细胞中高浓度物质溢出,测定结果偏高。如K、CK、LDH、AST等,轻度溶血即可有很大影响。
2、血细胞中浓度低于血清浓度:此时溶血相当于血清稀释而结果偏低。如血糖、r-GT等。
、检测大多是检测化学反应前后颜色变化程度来计算待检物浓度。血红蛋白的红颜色会造成干扰。
控制影响因素:
开展常规项目的室内质量控制,绘制质控图和观察室内环境;谨慎使用检测方法学;
在使用某一方法时,先虑标本量是否太少或血清凝固,需重新处理标本进行测定;如果是采用速率法,要考虑是否是酶活力过高;动态反应曲线是否正常,注意有无提示数据报警;
仪器方面,如果发现某一时间的结果全部偏低,就要考虑是否引入了系统误差,是否发生仪器的样品针堵塞,搅拌棒搅拌不均等情况,或样品针注射器漏气,或试剂的交叉污染,或光源灯老化等问题;避免标本的溶血或脂血现象。
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文献和实验(一)、仪器设备 医用微波炉; 水浴锅。 (二)、试剂 0.2mol/L HCl:HCl 8.2ml,H20 定容0.5L。0.1mol/L三乙醇胺(pH8.0):三乙醇胺 5.33ml,H20 定容0.4L。.5ml/L醋酸-2.5ml/L醋酸酐:三乙醇胺 13.2ml,NaCl 5g,浓HCl 4ml,H20 定容0.98L,醋酸酐 (用前加)2.5ml。20×SSC(pH7.0):NaCl 175.3g,枸橼酸钠 88.2g,H20 定容1L。100×
1、使用地高辛标记的核酸探针进行石蜡切片的 RNA 原位杂交第一天 1 ) 二甲苯于 37 ℃脱蜡 2 次,每次 15 分钟; 2 ) 无水乙醇浸泡 2 次,每次 3 分钟; 3 ) 95% 乙醇浸泡 2 次,每次 3 分钟; 4 ) PBS 清洗 3 分钟; 5 ) 2% 焦碳酸二乙酯室温下浸泡 10 分钟; 6 ) PBS 清洗 10 分钟; 7 ) 加入胃蛋白酶 25ul/ml , 37 ℃孵育 15 分钟; 8 ) PBS
g,H2O定容1 L。 100×Denhardt's:Ficoll 1g,PVP 1 g,BSA 1 g,H2O 定容50 ml。 杂交液:Formamide 5 ml,20×SSC 2.5 ml,Dextran sulfate 1 g,100×Denhardt's 0.5 ml,10%SDS 0.5 ml,10 g/L sperm DNA 0.1 ml,H2O 1.4 L。 BufferⅠ(pH7.5):0.1 mol/L ris·Cl,0.15 mol/L NaCl。
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