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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
500ml
操作步骤(仅供参考):
用适量的包涵体裂解缓冲液混悬细胞,采用超声、研磨、或酶溶解等方法裂解细胞。
12000g 4℃离心细胞裂解液5min。
分离包涵体,复性。
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验-CI (pH 6 .8 )50 mmol / L DTT2 % SDS (电泳级)0.1 % 溴酚蓝10 % 甘油2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化材料1 )酶溶法(1)裂解缓冲液:50 mmol / L Tris-CI (pH 8 .0 )1 mmol / L EDTA100 mmol / LNaCI(2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF )。(3)10 mg / ml 溶菌酶。(4)脱氧胆酸。(5)1 mg / ml DNase I。2 )超声破碎法(1 )TE 缓冲液
. ( 3 ) l× 凝胶电泳 加样缓冲液: 50 mmol / L Tris -CI ( pH 6 . 8 ) 50 mmol / L DTT 2 % SDS (电泳级) 0.1 % 溴酚蓝 10 % 甘油 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化 材料: 1 )酶溶法 (1)裂解缓冲液: 50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 ) 1 mmol / L EDTA 100 mmol
在 argarose 的 beads 上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads 上的 prorein A 就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 二、实验步骤 免疫共沉淀反应: 1. 转染后 24~48 h 可收获细胞,加入适量细胞裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解 30 min,细胞裂解液于 4 °C,最大转速离心 30 min 后取上清。 2. 取少量裂解液以备 Western blot 分析,剩余裂解液加
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