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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
500ml
操作步骤(仅供参考):
12000g 4℃离心细胞裂解液5min。
弃上清,沉淀混悬于9倍体积的包涵体分离缓冲液中,室温孵育5min。
12000g 4℃离心5min,沉淀用工作缓冲液(主要由脲、谷胱甘肽等组成)混悬,室温孵育60min。
复性。
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验,则设计用来分离蛋白质混合物,而亚单位之间的相互作用、蛋白质构象和生物学活性被保留。在非解离native缓冲液系统中,蛋白质的分离基于它们的荷/质比率。 连续缓冲液系统 在连续缓冲液系统中,凝胶的缓冲液和电泳缓冲液的组成基本上是相同的。它们由单一的分离胶组成,而且全部的样品、胶和电极槽使用相同pH的同样的缓冲液离子。 在连续缓冲液系统中,分子电荷密度和胶孔大小是仅有的影响分子的堆积和条带的锐度的因素,。使用连续系统时,蛋白质在样品孔中比在凝胶中移动的速度更快
荷相比较,多肽固有的电荷变得微不足到。因而,根据多肽的大小,相同大小的SDS-多肽复合物基本上具有相同的负电荷、形状和凝胶中的迁移率。这种方法简洁而快速,加之只需要微克量蛋白这一事实,使SDS-PAGE成为最广泛使用的,用来确定多肽样品分子量的方法。由于几乎任何来源的蛋白质很容易被SDS溶解,所以这种方法通常都可以适用。与之相反,用来进行非解离native电泳的非解离native缓冲液系统,则设计用来分离蛋白质混合物,而亚单位之间的相互作用、蛋白质构象和生物学活性被保留。在非解离native缓冲液
-CI (pH 6 .8 )50 mmol / L DTT2 % SDS (电泳级)0.1 % 溴酚蓝10 % 甘油2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化材料1 )酶溶法(1)裂解缓冲液:50 mmol / L Tris-CI (pH 8 .0 )1 mmol / L EDTA100 mmol / LNaCI(2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF )。(3)10 mg / ml 溶菌酶。(4)脱氧胆酸。(5)1 mg / ml DNase I。2 )超声破碎法(1 )TE 缓冲液
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