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B16(黑色素瘤细胞) 

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  • ¥600 - 2000
  • 上海烜雅
  • XY-XB-1101
  • 2025年07月16日
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      B16

    B16(黑色素瘤细胞)详细信息:
    中文名称:B16(黑色素瘤细胞)
    英文名称:B16
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中,加入约6ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

     
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
     
    1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
     
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
     
    2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
     
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心5分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
     
    注意
        我细胞库认为购买细胞的客户有培养细胞的经验,客户收到细胞后,严格按照本细胞培养条件更换完全培养基。如果因为客户缺少基本的细胞培养知识或培养条件而导致细胞各类问题,我库概不负责。对于因缺少细胞培养知识和时间,建议客户可联系我细胞库代为培养细胞和后续相关实验。
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    相关实验
    • B16细胞的传代

      细胞增殖快非常好养,但是要及时换液,否则也很容易死亡、或变形。我养的最好的时候,天天都在换液,两三天就要消化传代。我用的消化液一般是 消化用含EDTA的胰酶0.25%,个人感觉效果比较好一点。消化步骤:吸出培养液,加入PBS洗涤(视培养瓶大小加入相应的量,25CM加入1-2ML)而后加一次胰酶(25CM培养瓶加0.6ML)作用2-3分钟,轻轻摇晃使均匀作用在细胞层面上。要一直在显微镜下观察,以防消化过头,等细胞从梭形变成椭圆形(或是棱角变钝),本来连成片的细胞之间开始有小小的空间,细胞细胞

    • B16黑色素瘤细胞培养的经验

      B16黑色素瘤细胞。好像这株细胞还有亚型的,不过中科院说不清,我也就说不清了。总之是B16细胞总的来说比较好养,操作基本都是常规的。要求用胎牛10%1640、5%CO2、37度培养,一段时间为了省钱用过新生牛也不错。但是传代多了,细胞有形态改变。可以弃掉重新复苏。血清国产的杭州四季青,感觉不灭活比灭活要好养一些。传代操作,主要是无菌操作。细胞增殖快非常好养,但是及时换液,否则也很容易死亡、或变形。消化用胰酶0.25%,可以用含EDTA的,效率更高一点。消化步骤:弃血清——用D-hank's

    • 黑色素瘤

      黑色素瘤(melanmoa)又称为恶性黑色素瘤,是一种能产生黑色素的高度恶性肿瘤,大多见于30岁以上成人,发生于皮肤者以足底部和外阴及肛门周围多见,可以一开始即为恶性,但通常由交界痣恶变而来。凡黑痣色素加深、体积增大、生长加快或溃破、发炎和出血等常是恶变的象征。此瘤也可发生于粘膜和内脏器官。黑色素瘤的组织结构呈多样性,瘤细胞可呈巢状、条索状或腺泡样排列。瘤细胞可呈多边形或梭形,核大,常有粗大的嗜酸性核仁,胞浆内可有黑色素颗粒。也有胞浆内没有黑色素颗粒的黑色素瘤,称为无黑色素性黑色素瘤

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