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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
446
- 英文名:
MLV Reverse Transcriptase
- 保质期:
2年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
10KU|50KU
特别提示:包括MLV逆转录酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:MLV逆转录酶
英文名称:MLV Reverse Transcriptase
产品货号:MT0013
产品规格:10KU|50KU
MLV逆转录酶是我司在鼠源病毒反转录酶基础上进行改良而得的第四代反转录酶,可耐受55℃高温反应。相比于传统42℃条件下反转录反应,采用55℃反转录可更好地打开RNA二级结构,从而提高复杂RNA模板的扩增性能、提高反转录cDNA的长度和产量,因此能更好地提高后续检测的灵敏度。此外,MLV反转录酶通过定点突变去除了RNase H活性,从而避免反转录过程中降解RNA。同时经过突变文库筛选,使得其热稳定性更强。
产品组成:
| 组分 | MT0013-10000U | MT0013-50000U |
| MLV逆转录酶(200U/μl) | 50μl | 250μl |
| 10×RT Buffer | 500μl | 1ml×2 |
储存:-20℃可保存2年。
单位定义:以poly(rA)为模板、oligo(dT)为引物,在37℃条件下,10分钟内催化1nmol的dTTP掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定义为一个活性单位。
操作方法:
1.按以下组分配制反应体系:
| 加入物 | 加入量 |
| MLV Reverse Transcriptase | 0.5-1μl |
| 10×RT Buffer | 2μl |
| dNTP Mixture(10 mM each) | 1μl |
| Total RNA or Poly(A) RNA | 0.1-2μg |
| 20×Oligo dT(25)&Random Primer * | 1μl |
| RNase Inhibitor(40 U/μl) | 0.5μl |
| RNase-Free H2O | Up to 20μl |
*注:Oligo dT(25) 使用浓度为 20~50μM, 如使用Random9随机引物可使用125μM,基因特异性引物可使用5μM。
2.在PCR 仪上按下列条件进行反转录反应:
30℃——————15 min
55℃——————30~60 min
85℃——————10 min
4℃
3.反转录所得的cDNA 可直接用于 PCR 反应或储存于-20℃。
除了MLV逆转录酶,,我公司还供应以下相关产品:
名称:λ核酸外切酶
货号:BTN130628
规格:1000U
λ核酸外切酶作用于双链DNA,沿 5´→3´方向逐步切去 5´单核苷酸。zuì适底物是5´磷酸化的双链DNA,也能缓慢降解单链DNA和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA的切刻或缺口处起始消化。
产品特点:
1.高效5´→3´核酸外切酶;
2.切下双链DNA的5´单核苷酸。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
活性定义:1单位指在50μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内能从双链DNA底物上催化产生10nmol酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
备注:5´-0H端的切割速度比5´-PO4端慢20倍。单链DNA比双链DNA慢100倍。
名称:BbvI限制性内切酶
货号:SV0105
规格:1500U|300U|150U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
2,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
该酶切割产生一个 4 碱基的 5´突出端。
5´. . . G C A G C(N) 甘油浓度>5% 条件下可能出现星号活性。
名称:BsiEI限制性内切酶
货号:SV0179
规格:5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液,60℃。
浓度
10,000units/ml。
37℃ 时活性
30%。
甲基化敏感性
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
名称:CviQI限制性内切酶
货号:SV0298
规格:10KU|2KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 75%
BalbBuffer 2.1: 100*%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 75*%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1,25℃。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性:
10%。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
CviQl是Rsal的不完全同裂酶。
*在该缓冲液中可能出现星号活性。
名称:MwoI限制性内切酶
货号:SV0507
规格:2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,60℃。
浓度:
5,000units/ml。
37℃ 时活性
10%。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
名称:SalI-HF限制性内切酶
货号:SV0661
规格:10KU|10KU|2KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
名称:核酸外切酶 I(E. coli)
货号:SV1091
规格:15KU|3KU|1500U
特性:
3´ →5´ 单链外切酶活性
PCR 扩增后降解引物
概述:
具有从 3´ →5´ 方向水解单链 DNA 的外切酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株,其携带有从 E. coli NM554 克隆的 exo I 基因。
反应条件:
1X 核酸外切酶 I 反应缓冲液
[67 mM Glycine-KOH(pH 9.5 @ 25℃),6.7 mM MgCl2 ,10 mM 2-*基乙醇],37℃ 温育。
热失活:80℃ 加热 20 分钟。
质保声明:
核酸外切酶 I 经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟内催化释放 10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
20,000 units/ml。
名称:测序级胰蛋白酶(冻干粉)
货号:MQ0080
规格:100μg/1mg
CAS: 9002-07-7
EC: 3.4.21.4
储存温度:2-8℃
别名:重组修饰胰蛋白酶;重组甲基化修饰胰蛋白酶;重组甲基化修饰突变胰蛋白酶
来源:重组胰蛋白酶,基因工程生产,大肠杆菌表达
蛋白序列:氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致。
1.产品简介
重组胰蛋白酶是由重组大肠杆菌表达生产,氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致,无糜蛋白酶等杂酶污染,不含有且不需要TPCK抑制其他酶活性,活性高,酶切特异性高。胰蛋白酶容易自切产生自身自切片段影响质谱分析结果,甲基化修饰和突变保证其不自切,从而也去除了因自切而产生的假糜蛋白酶的活性。
2.产品特性
来源:重组大肠杆菌
外观:白色、类白色粉末
比活(单位/mg 蛋白)≥ 4500 USP units/mg pro.
蛋白电泳:单一主条带
电泳(分子量)24.0±2.4 kDa
纯度(HPLC)≥95%
3.推荐使用方法
建议使用50mMHAc或1mM HCl溶解或稀释。使用时,稀释在50mM NH4HCO3 或者ph7.0-8.0的缓冲溶液中。在酶切缓冲液中建议使用1mM CaCl2,重组胰蛋白酶:目的蛋白=1:20-1:100,zuì适PH为7.0-8.0。
4.储存和运输稳定性
储存稳定性:重组胰蛋白酶冻干粉存于2-8℃,24个月稳定;使用50mMHAc或1mM HCl溶解后储存于-20℃,反复冻融5次,无活性损失。
运输稳定性:蓝冰保温运输,活性稳定。
5.产品优势
序列分析纯蛋白酶:特异性高,稳定性好。
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产 品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
冻干粉:易于储存和运输。
符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2008质量体系并符合GMP指导原则。
质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
6.产品用途
重组胰蛋白酶具有与动物源性胰蛋白酶相同的酶学性质。可替代胰蛋白酶使用,且有很多优势,如无杂酶活性,高稳定性,不自切,高活性;在使用中,无非特异性酶切片段及自切片段出现。用于特异性的蛋白质酶解、蛋白测序、制作肽谱图、蛋白质组学研究、Z-D胶上的肽段的胰酶消化等。
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文献和实验逆转录反应,作为分子生物学研究的基本技术之一,已经广泛应用到多个研究领域,可以说是科研人员进行 RNA 功能研究的看家本事。 众所周知,逆转录的应用领域有以下 6 种: 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 定量RT-PCR(RT-qPCR) cDNA 克隆和文库构建 cDNA 末端快速扩增(RACE) 基因表达芯片 RNA 测序(RNA-Seq) 今天,小编就整理了一些贴士,帮助大家在面对 6 种不同的应用时,如何正确选择逆转录酶。 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 在 RT
又称 RNA指导的 DNA聚合酶。是以 RNA为模板合成 DNA的酶。这种酶是 1970年美国科学家特明( H.M.Temin)和巴尔的摩( D.Baltimore)分别于动物致癌 RNA病毒中发现的,他们并因此获得 1975年度诺贝尔生理学或医学奖。当 RNA致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒( Rous sar-coma virus)进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒 RNA互补的 DNA单链,继而复制出双螺旋 DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色
In Vivo Infection of Mice by Replication-Competent MLV-Based Retroviral Vectors
lentiviruses. Nevertheless, Murine Leukemia Virus (MLV)-derived vectors have been the most widely used both in the laboratory and in the clinic ( for reviews, see refs. 1 –4 ). the retroviral vector in its pro viral form. Culture supernatants are collected
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