中草药DNA提取试剂盒

特别提示：包括中草药DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：中草药DNA提取试剂盒
英文名称：Chinese herbal medicine DNA extraction kit

产品货号：中草药DNA提取试剂盒
产品规格：20次

基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪，保证药材质量，促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒，高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA的完整性；处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应，所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA 比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题，我们公司在植物DNA提取试剂盒产品基础上开发了本产品。

产品特点：
1.适合于大多数药材。
2. 得到的DNA 纯净，OD260/280一般都在1.6以上，原液或100倍之内的稀释液一般都能直接作为PCR 模板。
3. 操作简单，整个过程只需要三十分钟左右。
4. 试剂无毒无害，环保卫生。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	15ml
溶液B	15ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.75mL 加入到10-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取20mg左右的中草药，先剪成或研磨成微小的碎片，然后转移到预热的溶液A中匀浆，匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。也可以液氮研磨后将中草药粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨，因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟，然后全部转移到新的1.5mL塑料离心管中(此时匀浆液较为粘稠，可将枪头剪去一截后转移上清，植物碎片可倒入)。
4. 12000～15000g室温离心3分钟，将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中(上清液的体积一般为200-700μl，如果体积超过700μl，多余部分可以不要)。有的上清液中会有少量细小块状物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
5.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀(溶液将呈白色混浊状)，然后置冰浴中5分钟。
6. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新离心管中。
7. 加入0.2mL的氯*(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
8. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。
9. 重复氯*抽提步骤一次，此步可以有效去除含色素物质。
10. 加入0.6-1倍体积的异丙*(自备)，上下颠倒30秒混匀。
11. 12000～15000g离心5分钟，弃上清，管底将有微小DNA沉淀。
12.沉淀用75%乙醇清洗2次后，室温晾干。
13. 加入50-100μl自备缓冲液(如TE)溶解沉淀。DNA 即可用于电泳，酶切和PCR等反应。如果需要测OD，则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。
 注意:用本产品提供的RNase处理DNA样品时,做好按《分子克隆手册》等参考书上的方法彻底去除其中的DNase。

除了中草药DNA提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：红细胞裂解液A型(核酸纯化)
货号：BTN60403
规格：250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份，不含DNA和RNA，其所含血红素能抑制PCR反应，所以先用本产品裂解红细胞，再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。

产品特点：
1.快速，一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/氯*去蛋白质。
2.高效，一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞，一般样品最多只需要处理两次。
3.扩容性好，可以一次处理多达几十毫升的样品，也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在装有抗凝血液的离心管中，按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟，小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中，轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞，可以直接用于后续的实验。

名称：柱式质粒DNA提取试剂盒
货号：BTN60205
规格：50次
本试剂盒是用于质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理，再通过离心吸附柱，专一结合DNA，最后洗去杂质，高效快速提取质粒DNA，全套操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从1-5mL过夜培养的菌液纯化得到高达20μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0)，可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。

试剂盒特点：
1.快速、步骤少，整个操作在半个小时之内完成。
2. 不需要预平衡离心吸附柱。
3. 洗柱液即开即用，不需要额外加乙醇。
4. 纯度高，采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
5.产量高，每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
6. 用途广，适用于低拷贝和高拷贝质粒。
7. 价格低，比多数国内同类产品的价格更便宜。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	13ml
溶液B	13ml
溶液C	18ml
RNase A溶液(10mg/mL)	0.15ml
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
离心吸附柱，6层	50只
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，RNase A 需要-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中，摇匀后再取用，未用完的溶液A最好在4℃保存。
2.从筛选平板上挑取单菌落至含抗生素的培养基中，37℃震荡培养12-16小时(摇床转速200-300)。注意：建议使用LB培养基，营养更丰富的培养基会使菌体浓度过高，超过纯化系统处理能力而降低DNA 质量。另外，延长培养时间有利于提高质粒DNA浓度，但是菌液培养过长时间会因细胞死亡、裂解而造成质粒DNA浓度降低。
3. 用1.5mL离心管收集1-4mL 过夜培养饱和菌液，室温12000rpm离心1分钟，弃上清，再短暂离心，吸弃残留液体。
4. 加入250μL溶液A，用枪头充分吹打使菌体重悬(此步在冰上操作效果更佳)。
 注意：细胞未充分悬浮会影响后续操作，可以使用漩涡振荡器帮助混匀或使用Tip 吸头吹打沉淀至完全混匀。
5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀，用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用)，温和反复颠倒混匀4-6次，看到溶液变粘即可，然后冰上放置不超过4-5分钟。注意：此步处理不能超过5分钟，否则DNA的碱损伤比较严重。同时千万不要剧烈振荡，否则基因组DNA 断裂产生的片段非常容易污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放，否则空气中的二氧化碳会进入溶液，形成碳酸，中和溶液B中的NaOH，降低其效率)。
6. 加入350μL 冰上预冷的溶液C，反复颠倒混匀4-6次，可见白色沉淀物产生，然后冰上放置至少5分钟。
7. 最高转速(12000rpm以上)4℃离心5分钟，小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大，有时候出现沉淀漂浮是正常现象，取上清时避开漂浮的沉淀即可。如果此步的离心在室温进行，更容易出现沉淀物漂浮的现象。
8. 静置2分钟以让质粒DNA与吸附柱充分结合，此步十分重要。
9.室温12000rpm离心1分钟，弃收集管中的废液。
10. 加入500μL的通用洗柱液，室温12000rpm离心1分钟，弃收集管中废液。
 注意：通用洗柱液中含乙醇，用后需要将盖拧紧存放，否则乙醇会挥发。
11. 重复上步1次。
12.室温12000rpm离心1分钟，甩干残留液体。此步不能省略，否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
13. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中，加入30-100μL65-80℃预热的DNA 洗脱液2.0，室温放置2分钟。常温的DNA 洗脱液2.0也可以用于洗脱，但产量稍微有所降低。
14.室温12000rpm离心1分钟，离心管底溶液即质粒DNA。
15. 由于百奥莱博的吸附柱结合DNA 能力较强，如果再加适量DNA 洗脱液2.0 到离心吸附柱中，往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第一次洗脱的20-30%)，但注意不要使用上步得到的DNA洗脱液2.0来洗脱。