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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
100ml
操作步骤(仅供参考):
按实验具体要求操作。
注意事项:
如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验HIS 标签蛋白纯化效果不理想,宝宝心里苦呀。今天,小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的 HIS 标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面: 1、HIS 标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高,容易导致蛋白炭化;功率过低,蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率,同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素,如:金属离子螫合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时,优化缓冲液
液(若匀浆液太稠,则再加入lmlTE缓冲液),然后再加入等体积苯酚:氯仿混和液抽提。每次抽提轻缓地来回摇动5分钟,然后离心t0000转/分钟×5分钟,水相吸入另一干净的离心管中,重复抽提二次。 注意:每次水相时不要将界面上的变性蛋白质混入,抽提二次后一般有机相和水相界面上的变性蛋白质极少,肉眼基本看不见。若界面上变性蛋白质仍较多,可增加抽提次数 4.水相加入一刻度离心管中后,加入2.5倍体积的冰无水乙醇(可用刻度离心管测量体积)。加5mol/LNaGI到终浓度为0.1mol/L,在离心管中轻缓的混匀
一、实验概要 PCR 扩增目标 DNA 片段。 二、实验原理 多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)基本原理类似于 DNA 的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR 由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板 DNA 的变性:模板 DNA 经加热至 93℃ 左右一定时间后,使模板 DNA 双链或经 PCR 扩增形成的双链 DNA 解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备; 2. 模板 DNA 与引物
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