核酸杂交液

原位核酸分子杂交组织(或细胞)化学技术简称原位杂交。其基本原理是两条核苷酸单链片段在适宜的条件下通过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双链分子的特点，把带有标记的(有放射性核素，如3H、35S、32P及荧光素、生物素、等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内待测核酸（RNA或DNA）片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位。做核酸杂交时，首先要进行预杂交，即用非特异的核酸溶液封闭膜上的非特异性结合位点。核酸交液主要由去离子甲酰胺、SSC、变性鲑鱼精DNA等组成。预杂交和杂交都使用相同缓冲液，不同的仅仅是预杂交液中不含有探针。

操作步骤(仅供参考)：
1、 杂交前预处理。
2、 在脱水后的玻片上滴加100～120μl核酸预杂交液，置于放有湿盒液的湿盒中，55～58℃下预杂交2h，甩掉预杂交液。
3、 取杂交液加入适量探针(RNA探针分子的浓度一般为0.5～2μg/ml，DNA探针分子的浓度一般为1μg/ml)，70℃ 变性10min，冰上放置1min。
4、 滴加60μl核酸杂交液于玻片上，置于放有湿盒液的湿盒中，48～58℃下杂交18～30h。
 
注意事项:
本品使用前切忌核酸污染。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。