- ¥190
- 晶抗生物
- JK2504
- 进口/国产
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
500ml
在组织切片过程中，一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。对含钙组织固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。EDTA是一种相对较的螯合脱钙剂，对组织结构影响小，可以较的保存组织的某些酶类，经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。
自备材料：
1、 PBS
2、 蒸馏水
3、 加热装置或微波炉
注意事项：
1、 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可。
2、 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。
3、 脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。
4、 脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。
5、 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。
6、 每隔一段时间检测一次脱钙程度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。
7、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验或碎裂并损伤切片刀刃。脱去钙盐的过程――称为脱钙。脱钙时应注意： 1.骨组织固定24小时后，锯下不超过0.5mm厚的薄骨片，再以10%福尔马林固定后进行脱钙。（未固定的组织在酸性脱钙液中受到的损伤比已固定的组织约大三倍）。骨组织过厚则需延长脱钙时间，长时间浸于强酸影响切片染色效果。 2.在不影响诊断的条件下，应将骨组织周围的软组织全部剥去。如果切片目的在于观察骨髓病变或骨组织肿瘤，最好除去一部分正常的致密的骨组织，以利于脱钙和制片。 3.脱钙前最好先将骨组
样本采集和快速冷冻的时间。 2. 即时加入 RNA 稳定剂，使组织内的 RNase 失活及保护组织中的 RNA。 3. 快速匀浆，加入裂解液若粘稠至不能有效分层，可继续加入更多裂解液。 4. 采用 RNeasy Mini Kit（货号：74104）提取时，可将缓冲液 RLT 中加入的巯基乙醇含量提高至 3%-5%，能够有效改善结果。 血液样本 提取得到的 RNA 量少；由于 RNase 得到的 RNA 完整性较差，有降解；污染物包括抗凝剂-肝素和 EDTA，以及天然酶抑制剂影响下游 RNA
组化染色常不能到达理想结果或不成功。组织同样不能长时间放置在70%的乙醇中，酒精固定后的组织形态不如福尔马林固定的组织。脱钙液对抗原破坏较为严重，因此在组织脱钙前最好在福尔马林液中固定48小时，若组织没有固定透则酸会破坏抗原，脱钙液中酸的浓度与脱钙时间都必须尽量控制在最低的限度。3、浸蜡：我们认为浸蜡温度应控制在58~60℃左右，浸蜡用的石蜡应经常更换，以减少石蜡中二甲苯的含量。高温下的二甲苯容易使组织发脆，细胞收缩，更容易掉片。4、切片厚度：用于免疫组织化学染色的切片厚度为3-4微米。为防止在染色过程
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