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- 百奥莱博
- BTN60807-OGC
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
83
- 英文名：
Endotoxin-free plasmid DNA column extraction kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
常温运输及保存，有效期一年。RNase A(10mg/mL)需要低温
- 规格：
50次
特别提示：包括柱式无内毒素质粒DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：柱式无内毒素质粒DNA提取试剂盒
英文名称：Endotoxin-free plasmid DNA column extraction kit
产品货号：柱式无内毒素质粒DNA提取试剂盒
产品规格：50次
本试剂盒是整合我们公司柱式质粒DNA提取和菌体内毒素清除剂两产品而成。菌体内毒素清除剂是我们公司独家推出的产品，在质粒提取前就把细胞壁上的内毒素清除掉，彻底避免了目前通用的先提取DNA+内毒素混合物，再从中纯化质粒DNA的弊端。用本产品提取的质粒DNA，内毒素的污染浓度低，适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点：
1. 操作简单，只在经典的柱式质粒DNA提取前，增加菌体内毒素清除一步。
2. 去内毒素效果好，处理一次可以去除99%以上的内毒素。
3.质粒丢失少，产率只比柱式质粒DNA提取低5-10%，效果好于先提质粒DNA，再用液相内毒素清除剂处理的方法。
4. DNA可以直接用于转染等实验。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| 菌体内毒素清除剂 | 200ml |
| 溶液A | 13ml |
| 溶液B | 13ml |
| RNase A(10mg/mL) | 150μl |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：常温运输及保存，有效期一年。RNase A(10mg/mL)需要低温运输和保存。
使用方法：
一: 用菌体内毒素清除剂清除E.coli细胞壁上的内毒素。
1. 收集1.5-3mL E.coli饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2. 加入1mL本产品温和混匀后10,000-12000rpm离心1分钟，弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3-4次，得到的菌体可以直接进入后续的质粒DNA提取步骤。
二：从无内毒素的E.coli中提取质粒DNA
1. 用1.5mL离心管收集1-4mL 过夜培养饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，再短暂离心，吸弃残留液体。
2. 加入250μl溶液A，用枪头充分吹打使菌体重悬。
3. 加入250μl溶液B(如果有沉淀，用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用)，温和反复颠倒混匀4-6次，看到溶液变粘即可。千万不要剧烈振荡。
4. 加入350μl溶液C，反复颠倒混匀4-6次，可见白色沉淀物产生，然后冰上静止2-5分钟。注意：不要超过5分钟。
5.室温12000rpm离心10分钟，将上清液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
6. 12000rpm离心1分钟，质粒DNA吸附到膜上，弃收集管中的废液。
7. 加入500μl的通用洗柱液，12000rpm离心1分钟，弃收集管中的废液。注意：我们公司的通用洗柱液是由乙醇和含NaCl的溶液组成，NaCl在其中的溶解度较低，放置一段时间后可能会产生NaCl沉淀。如果有沉淀，用前最好加热使之溶解并混匀后使用。
8. 重复上步操作1次。
9. 12000rpm离心1分钟，甩干残留液体。此步不能省略，否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA沉不到加样孔里去)和酶反应。
10. 将离心柱置于新的1.5mL离心管(自备)中，加入50μl DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。
11. 12000rpm离心1分钟，离心管底溶液即质粒DNA。
12. 由于天我们公司的吸附柱结合DNA能力较强，需要再加入50μl DNA洗脱液2.0到离心吸附柱中，室温放置2分钟，重复上步操作，往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第一次洗脱的20-30%)。注意不要使用上步得到的含有DNA的洗脱液来进行第二次洗脱。
13. 将两次洗脱收集到的质粒DNA汇集即可立即使用或放冰箱保存。
除了柱式无内毒素质粒DNA提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN3660 | 非冻型组织DNA保存液 | 250mL |
| BTN71206 | 柱式动物DNA提取试剂盒 | 50次 |
| BTN121102 | 柱式鼠尾DNA提取试剂盒 | 50次 |
| BTN3672 | 植物DNA提取试剂盒 | 50次 |
| BTN80803 | 柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(PCR级) | 50次 |
| BTN90303 | 硅胶膜DNA离心吸附柱(大量提取) | 1套 |
| WE0166 | 无内毒素质粒中提试剂盒 | 50次 |
| WE0171 | 固定组织基因组DNA提取试剂盒 | 50次 |
| WE0172 | 新型固定组织基因组DNA提取试剂盒 | 50次 |
| WE0177 | 柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml) | 50次 |
| WE0178 | 细菌基因组DNA提取试剂盒 | 50次 |
| WE0179 | 口腔拭子基因组DNA提取试剂盒 | 50次|200次 |
| WE0182 | 水产动物基因组提取试剂盒 | 50次 |
| WE0186 | 鼠尾基因组DNA提取试剂盒 | 50次 |
| WE0209 | 磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒 | 96次 |
| ALH111 | 小量全血基因组DNA提取试剂盒(0.3ml) | 50次×0.3ml|200次×0.3ml |
| ALH122 | 细胞/组织基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附) | 50次|100次|200次 |
| ALH181 | 鱼类组织DNA提取试剂盒 | 50次|100次 |
| ALH025 | 细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒 | 50次 |
| ALH090 | 无内毒素质粒大量提取试剂盒(高纯质粒)(柱式提取) | 10次 |
| RFT036 | 土壤基因组DNA提取试剂盒 | 50次 |
| SY0001 | 蛋白酶K | 100mg |
| SY0007 | 核糖核酸酶A(来源于牛胰腺) | 100mg |
| QN0884 | 粪便基因组DNA提取试剂盒 | 50T|100T |
| QN0907 | DNA提取酚试剂 | 250ml |
| QN0908 | 核酸提取试剂 | 250ml |
| CZ003 | 磁珠法游离DNA提取试剂盒 | 20次/100次/10次(L)/50次(L) |
| ML018 | 核酸（DNA/RNA）提取试剂盒(磁珠法) | 64T |
| GL2816 | 大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒(CTAB沉淀法) | 50T |
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
来看一下。提交订单，等待引物到达：华大基因的速度非常快，大约在 2 - 3 个工作日即可拿到，在等待期间需要准备好：LB + 抗生素抗性平板；感受态细胞及相应培养基；无内毒素的 Cas9 载体质粒；BbsI 限制性内切酶；质粒小提试剂盒；常规限制性内切酶。
只适合酶切测序等。而我用无内毒素大提试剂盒时，就没出现这种情况，溶度有1000多微克每毫升。所以，建议：1.要转染最好就用无内毒素大提试剂盒2.已小提，想纯化滤菌用于转染建议参考“将质粒溶液进行浓缩，每50微升质粒溶液加2微升5mol/L NaC1混匀，冷的无水乙醇沉淀质粒，10 000r/min离心5min，弃去上清，用70% 的乙醇洗1次，无菌条件下真空干燥，以灭菌生理盐水溶解质粒至质量浓度为1 微g/微L，一20度保存。质粒转染前，行酶切及测序鉴定。”
2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒：MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒： MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout（动物DNA提取试剂盒）：3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout（植物DNA提取试剂盒）：3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒)： 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒： 3673-10 10 次 90元
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