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优利科(上海)生命科学有限公司
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50次
产品名称:柱式质粒DNA提取试剂盒
规格:50次
使用说明书:随货寄送
用途:仅供科研实验,不作临床诊断和食品加工等其他用途
优势:现货供应,公司直销,提前预定的客户可获取新批次产品,我司为专营生物试剂的公司,严格按照国家规定和生产标准进行,保质保量,请客户放心购买
提供服务:免费代测、抗体标记、化学品定制、抗体定制以及各种技术服务。


核酸概述:
一、核酸的分类
生物的核酸包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类;细胞中的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA三大类。
二、生物的遗传物质
1.某些病毒以RNA为遗传物质。这些病毒又叫做RNA病毒,所含核酸也只有RNA。如HIV、H1N1、SARS、烟草花叶病毒等。
2.还有某些病毒以DNA为遗传物质,这些病毒又叫做DNA病毒,所含核酸也只有DNA。如T2噬菌体等。
3.以细胞为结构和功能基本单位的生物,细胞中同时含有DNA和RNA。
包括所有的原核生物、真核生物。这些生物都以DNA为遗传物质,而不以RNA为遗传物质。
三、核酸的分布
1.RNA病毒的RNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
2.原核细胞的RNA分布在细胞质基质、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
3.真核细胞的RNA分布在细胞核、细胞质基质、线粒体、叶绿体、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
4.DNA病毒的DNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
5.原核细胞的DNA分布在拟核、质粒中,不与组蛋白结合成染色体。
6.真核细胞的DNA主要分布在细胞核中,与组蛋白结合成染色体。
7.真核细胞的线粒体、叶绿体两种细胞器也具有自己的DNA和RNA。但都不与组蛋白结合成染色体。

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内切酶是切不开了。容易受甲基化影响的内切酶有:Dpn1(GA/TC)天生就甲基化;Cla1(ATC/GAT)如果前面加个 G 或后面加个 C 那么恭喜你,dam 甲基化;Xba1(T/CTAGA)如果前面加个 GA 或后面加个 TC 也是 dam 甲基化,等等有好多。这些容易甲基化的切点设计引物时一定要注意,避免引入甲基化位点。如果真是避免不了或者后来才发现问题,那么把甲基化的质粒转化到甲基化酶缺陷型大肠杆菌中再提质粒就没有甲基化,可以切了。甲基化缺陷型菌有:DM1、INV110、JM110
前一阵子一直在做双酶切质粒重组,失败了很多次,不过很快改善了实验方法,用2周重组了14个质粒。现就自己的体会,谈一下质粒重组的一些个人经验。 1. 回收PCR产物: 在进行PCR扩增时候,给引物两端设计好酶切位点,一般说来,限制酶的选择非常重要,尽量选择粘端酶切和那些酶切效率高的限制酶。选好酶切位点后,在各个酶的两边加上保护碱基。 双酶切时间及其体系:需要强调的是很多人建议酶切过夜,其实完全没有必要,我一般酶切3个小时,其实1个小时已经足够。应用大体系,如100
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