
总外泌体捕获和定量试剂盒(细胞培养上清)
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
上海信裕生物科技有限公司
- 规格:
1
外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能,在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子;然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。
外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒,而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。宇玫博生物自主开发的外泌体快速提取试剂盒,组分经过优化处理,适用于血清、血浆中的外泌体提取,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒,可用于电镜分析、NTA粒径分析、蛋白分析研究等。
产品组成
| 组分名称 | 规格 |
| Blood IsoExo Solution*(BIS) | 100 mL |
| *RNase/DNase Free, Sterile |
1,高速离心机 (可以达到10000 g离心力),2 mL离心转子,1.5 mL离心管;
2,1×PBS缓冲液(无菌);
总外泌体捕获和定量试剂盒(细胞培养上清)操作规程
一、样品预处理
1,取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于25℃水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;
2,样品初始用量:(单次提取时的样品量)
| 样品名称 | 最低量 | 最高量 |
| 血 清 | 0.2 mL | 1 mL |
| 血 浆 | 0.2 mL | 1 mL |
4,上清液转移:去除细胞碎片的离心上清液转移到新的离心管中;
5,离心去杂质:转移后的上清液于4℃以10000 g离心20 min,去除样品中杂质,将离心后的上清液转移至新的离心管中。
二、总外泌体捕获和定量试剂盒(细胞培养上清)提取外泌体
1,上清液预处理:在去除杂质的离心上清液中加入Blood IsoExo Solution (BIS)试剂,具体的加入剂量如下:
| 样品名称 | 样品剂量 | BIS剂量 |
| 血 清 | 0.2 mL | 1 mL |
| 血 浆 | 0.2 mL | 1 mL |
2,溶液混合:加入ECS试剂后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再放置于2℃至8℃静置2h;
3,沉淀外泌体:取出装有混合液的离心管于4℃以10000 g离心60 min,弃上清,沉淀中富含外泌体颗粒;(注:尽可能吸净上清液)
4,外泌体重悬:取50 μL 1×PBS均匀吹打离心沉淀物,待其均匀悬浮在PBS中后,将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中;(建议PBS液加入体积:初始样本体积=1:4)
5,总外泌体捕获和定量试剂盒(细胞培养上清)收获外泌体颗粒:将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃以12000 g离心2 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒。
6,外泌体的保存:提取后的外泌体保存于-80℃低温冰箱中,以备后继实验使用。
储存条件
本品在室温可稳定保存24个月,使用前请充分混匀。
注 意
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验文献中常用的分离外泌体的方法主要是超离法和试剂盒法,那这两种方法研究人员该如何选择呢?为了解决大家的疑惑,我们专门做了对比实验进行阐述。 四、超速离心法与试剂盒法比较 (一)实验分组和开展实验确定: 此实验共分为 3 组,每组设置 2 个重复,所选原始样本是 293T 细胞培养上清。 组1:超离法分离(UC-1,UC-2); 组2:使用某国外试剂盒 SXX(SXX-1,SXX-2); 组3:使用某国内试剂盒 UXX(UXX-1,UXX-2)。 开展
培养 24 - 48 h,细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基: 待细胞汇合度~50%时,移去原有完全培养基,添加新培养基进行培养,新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成; 待细胞生长汇合度约为70-80%时,移去培养基; 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次; 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h,待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液,该上清液即可用于外泌体
了外泌体中的脂质、RNA 和蛋白质,还有微囊泡、凋亡小体等囊泡类型的信息。 ExoCarta(http://exocarta.org/index.html)数据库主要收录了包括人、大鼠、小鼠、绵羊、豚鼠、果蝇、马、穴兔、牛在内的几个物种的 286 个研究结果,含蛋白质、mRNA、miRNA 和脂质等信息。 三、如何获得外泌体样本及预处理? 外泌体广泛存在于细胞培养上清以及各种体液中,包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等。不同的样本来源,预处理及注意细节均不同,下面
技术资料暂无技术资料 索取技术资料








