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- 外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放exosome。目前外泌提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。
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- 2025年07月15日
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- 提供商：
上海联迈生物工程有限公司
- 服务名称：
外泌体提取
- 规格：
1
外泌体提取和DNA分离试剂盒（Exosome Extraction & DNA Isolation Kit）结合我们的外泌体提取试剂，能够从细胞培养上清或体液（血清/血浆等）中同时分离外泌体和循环DNA。利用优化的裂解液提取已分离的外泌体DNA，采用吸附柱（Spin Columns）法方便、快捷地纯化、洗脱外泌体DNA，可直接用于下游应用，如real time PCR，Expression Array Assays，NGS等。
总外泌体捕获和定量试剂盒（细胞培养上清）产品特点：
可获得回收率、高纯度游离DNA和外泌体相关DNA。
操作简单、快捷，不需要额外仪器设备。
可小体积洗脱。
适合后续各种DNA实验，如qPCR或数字
产品应用：
可简单、快速富集各种样本中游离DNA和外泌体颗粒。
可通过DNase I处理降解样本中游离DNA，而外泌体中DNA不受影响，可单独纯化外泌体中DNA。
可应用qPCR或数字PCR检测和发现突变，应用于液体活检。
总外泌体捕获和定量试剂盒（细胞培养上清）提取的DNA可用于构建文库及测序。
收集临床诊断为肠癌患者，应用“外泌体提取和DNA分离试剂盒”中外泌体提取试剂沉淀血浆中外泌体颗粒，分别经过Dnase I处理和不经过Dnase I处理来区分提取的外泌体相关DNA，应用安捷伦2100 Bioanalyzer测定DNA分布图（图1），从中得出：外泌体提取试剂不仅能富集血浆中外泌体颗粒，同时血浆中游离DNA也能被沉淀下来，经过Dnase I消化，可以降解血浆中游离DNA，但外泌体膜性结构可阻止Dnase I对外泌体内含物DNA消化。以提取的DNA为模板，应用ARMS-PCR技术对KRas突变检测（图2），在KRas突变的肠癌患者中，检测的Ct值较健康人小，同时经过Dnase I处理，可提高肠癌患者与健康人Ct值差值（△Ct）检测的特异性和灵敏度。
总外泌体捕获和定量试剂盒（细胞培养上清）外泌体提取和DNA/RNA分离纯化方面积累了丰富经验，结合我们的实验条件，可以提供：
1、外泌体的提取和纯化，外泌体定量（NTA和ELISA）。
2、外泌体核酸分离和纯化，外泌体核酸检测（qPCR或NGS）。
3、外泌体蛋白质鉴定，如Western Blot,蛋白质质谱分析等。
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文献和实验文献中常用的分离外泌体的方法主要是超离法和试剂盒法，那这两种方法研究人员该如何选择呢？为了解决大家的疑惑，我们专门做了对比实验进行阐述。 四、超速离心法与试剂盒法比较 （一）实验分组和开展实验确定： 此实验共分为 3 组，每组设置 2 个重复，所选原始样本是 293T 细胞培养上清。 组1：超离法分离（UC-1，UC-2）； 组2：使用某国外试剂盒 SXX（SXX-1，SXX-2）； 组3：使用某国内试剂盒 UXX（UXX-1，UXX-2）。 开展
培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌体
了外泌体中的脂质、RNA 和蛋白质，还有微囊泡、凋亡小体等囊泡类型的信息。 ExoCarta（http://exocarta.org/index.html）数据库主要收录了包括人、大鼠、小鼠、绵羊、豚鼠、果蝇、马、穴兔、牛在内的几个物种的 286 个研究结果，含蛋白质、mRNA、miRNA 和脂质等信息。 三、如何获得外泌体样本及预处理？ 外泌体广泛存在于细胞培养上清以及各种体液中，包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等。不同的样本来源，预处理及注意细节均不同，下面
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