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大量
- 保质期:
12个月
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
500ml
产品简介:
在组织切片过程中,一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。EDTA是一种相对较的螯合脱钙剂,对组织结构影响小,可以较的保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。
福尔马林-EDTA脱钙液主要由福尔马林、EDTA等组成,pH值约为7.2~7.4,相对于常规EDTA脱钙液,该试剂脱钙后对组织结构损害小,但脱钙速度更慢。其优点是:①经EDTA脱钙的组织染色结果;②对组织的结构损害比常规EDTA脱钙液更小。其缺点是:①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬;③不宜用化学方法确定脱钙终点。
福尔马林-EDTA脱钙液
注意事项:
1、 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可。
2、 适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于60℃。
3、 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
4、 脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5、 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6、 每隔一段时间检测一次脱钙程度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
7、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验或碎裂并损伤切片刀刃。脱去钙盐的过程――称为脱钙。脱钙时应注意: 1.骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5mm厚的薄骨片,再以10%福尔马林固定后进行脱钙。(未固定的组织在酸性脱钙液中受到的损伤比已固定的组织约大三倍)。骨组织过厚则需延长脱钙时间,长时间浸于强酸影响切片染色效果。 2.在不影响诊断的条件下,应将骨组织周围的软组织全部剥去。如果切片目的在于观察骨髓病变或骨组织肿瘤,最好除去一部分正常的致密的骨组织,以利于脱钙和制片。 3.脱钙前最好先将骨组
样本采集和快速冷冻的时间。 2. 即时加入 RNA 稳定剂,使组织内的 RNase 失活及保护组织中的 RNA。 3. 快速匀浆,加入裂解液若粘稠至不能有效分层,可继续加入更多裂解液。 4. 采用 RNeasy Mini Kit(货号:74104)提取时,可将缓冲液 RLT 中加入的巯基乙醇含量提高至 3%-5%,能够有效改善结果。 血液样本 提取得到的 RNA 量少;由于 RNase 得到的 RNA 完整性较差,有降解;污染物包括抗凝剂-肝素和 EDTA,以及天然酶抑制剂影响下游 RNA
组化染色常不能到达理想结果或不成功。组织同样不能长时间放置在70%的乙醇中,酒精固定后的组织形态不如福尔马林固定的组织。脱钙液对抗原破坏较为严重,因此在组织脱钙前最好在福尔马林液中固定48小时,若组织没有固定透则酸会破坏抗原,脱钙液中酸的浓度与脱钙时间都必须尽量控制在最低的限度。3、浸蜡:我们认为浸蜡温度应控制在58~60℃左右,浸蜡用的石蜡应经常更换,以减少石蜡中二甲苯的含量。高温下的二甲苯容易使组织发脆,细胞收缩,更容易掉片。4、切片厚度:用于免疫组织化学染色的切片厚度为3-4微米。为防止在染色过程
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