HepG2.2.15 表达HBV病毒的人肝细胞

PCR法检测乙肝病毒（HBV）

的模板。重复上述循环过程，经过20～30个周期后，特异的目的DNA可扩增百万倍以上。 PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后即可观察到特异的扩增条带。PCR方法操作简便，灵敏度高，可检测出少至0.1pg的目的DNA。目前已广泛应用于多种病原微生物的检测。乙肝病毒（HBV）感染引起的乙型肝炎，在我国发病率很高，而且HBV与肝硬化、原发性肝癌关系密切，因此，HBV的诊断极为重要。PCR检测HBV-DNA敏感性明显高于传统的血清学方法，且能显示HBV在体内复制情况，直接反映患者血液的感染性，并对模棱两可的或与临床

抗乙型肝炎病毒(HBV)感染免疫

泌IFN-γ和TNF-α等有效抑制肝细胞中HBV基因表达和复制，而并不杀伤这些肝细胞。IFN-γ可激活肝巨噬细胞分泌更多TNF-α。TNF-α在转录后水平上加速胞质病毒mRNA降解。     肝组织内有大量T细胞和Mφ等单个核细胞浸润，这些免疫细胞的直接杀伤作用和分泌炎性细胞因子的致炎作用，可能是慢性乙肝肝组织损伤的直接原因。最新研究发现在发生急性自限性乙肝患者体内，CTL数量和比例不高但特异性CTL的比例很高；相反，慢性乙肝患者体内，CTL数量比例虽高，然而特异性CTL比例较低，提示大量

Cas9 蛋白过表达慢病毒包装

特异性更高。您可以根据实验设计需要进行选择。 2、慢病毒包装载体：Cas9 慢病毒表达载体采用 3 质粒慢病毒系统。您可使用我公司的 pH1、pH2；addgene 载体 psPAX2、pMD2.G 或者 pCMV-dR8.2 dvpr、pCMV-VSVG 均可包装成功。 3、无内毒素质粒提取试剂盒。使用质量可靠的质粒提取试剂盒可以提供更高的转染效率和病毒包装效率。我们采用 Qiagen 的 Plasmid Plus 系列产品可以取得满意的包装效果。 4、转染