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预染宽范围蛋白质分子量标准(19-117KD)/6条带

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  • 上海烜雅
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  • 2025年07月14日
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      Protein Marker

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    预染宽范围蛋白质分子量标准(19-117KD)/6条带详细信息:
    产品介绍 产品简介: 
    本产品由跨度从10~180 kDa 的11 种纯化的天然蛋白混合而成,各条带浓度约为0.1~0.5 mg/ml。其中25 kDa 和70 kDa 条带为加强条带,方便判断各个条带的准确位置。本产品适合作为SDS-PAGE 电泳时,变性蛋白样品的分子量参照,并可实时观察蛋白样品的电泳分离状况,也可用于检测Western blot 的转膜效率。由于共价结合的染料会影响蛋白质分子的电泳迁移率,本产品仅适于粗略地估计目的蛋白样品的分子量。
    使用说明: 
    1. 将本产品于室温融化后,轻轻混匀,使沉淀充分溶解。
    2. 上样5ul,SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的条带。
    3. 建议依据待测蛋白分子量选择合适的分离胶浓度。

    注意事项: 
    1. 使用时应该将从低温取出后的产品恢复至室温后混匀,然后再上样,否则可能由于低温下蛋白变性不彻底导致电泳条带出现不同程度的弥散或拖带。
    2. 转膜效果与转膜时间有关,需根据客户目的条带大小而定,如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜成功,属于正常现象。
    3. 本产品含有SDS,蛋白已变性,不宜作为天然蛋白分子电泳时的分子量参照标准。
    产品图片 产品细节图片1
    Prestained Protein Marker(10-180 kDa)
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      2. 次优样品分离。(A) 负载影响条带分辨率。 (B) 上样量过低会导致条带扭曲。 在上样缓冲液中准备好样品和分子量标准,其最终的体积通常占胶孔体积的 30%。由于孔底分布不均匀(图 2B),使用较少的上样体积会导致条带扭曲。对于含有 DNA 结合蛋白或粘性末端的样品,凝胶上样之前,混合物需加入至 含有 SDS 的上样染料中一同加热,因为蛋白质结合以及 DNA 片段之间的相互作用会导致分离效果不佳。 c .上样染料和缓冲液选择 制备凝胶电泳时,样品中添加了凝胶上样缓冲液 (通常是 6X 或 10

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    • Western 实验步骤

      转印夹,注意 PVDF 膜与胶,PVDF 膜与滤纸,滤纸与胶之间不可有气泡。 2) 转印槽加满转膜缓冲液,插入电转印夹,将转印槽放入冰水中,确保 PVDF 膜靠近正极,带负电的氨基酸和蛋白质向正极迁移。 3) 转膜选择恒流,每个转印槽建议电流为 150-300 mA,时间依据目的蛋白条带分子量大小做适当调整。 4) 转膜结束后,将 PVDF 膜置于丽春红染色液中,室温 5-10 分钟即可见红色条带,用洗涤缓冲液洗数次可洗掉红色条带进行后续实验 。 封闭 1) 漂洗印迹膜:使用洗涤缓冲液室温适当漂洗

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