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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
DAB(Diaminobenzidine)Kit
- 保质期:
详询
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
详询
- 规格:
20
DAB染色试剂盒:(DAB)是辣根过氧化物酶最敏感、最常用的显色底物,反应产物为不溶于水、二和醇的棕色沉淀物。本产品采用特殊配方,灵敏度高,背景低,储存稳定,使用方便。适合于蛋白印迹、免疫组织化学和免疫细胞化学、斑点印迹和生物芯片等的染色和显色反应。
包装
试剂 规格
A显色液 (白色) 1ml(25X)
B显色液 (白色) 1ml(25X)
C显色液(棕色) 1ml(25X)
用法
在1ml蒸馏水中依次滴加显色液A、B、C各一滴,混匀后即可使用。显色时间1-30分钟,显色时间过长可引起本底增高,故应密切观察显色过程(一般3-10分钟最理想),并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。
储存
试剂盒应在-20℃,避光、密封保存,4℃可保存一个月。
注意事项
1. DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶完全溶解再行使用;
2. 显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;
3. DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染此溶液必须现用现配,配好后避光保存,30分钟内使用,剩余的液体应弃去;
4. DAB有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具。
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文献和实验:使用 Anti-phospho-Akt (Ser473) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。(图 A)使用免疫组化试剂盒M&R HRP/DAB Detection IHC Kit,抗体 1:100 稀释;(图 B) 采用普通免疫组化试剂盒,抗体 1:25 稀释。 图 6 免疫组化实验检测 Erk1/2 表达 注:使用 Anti-Erk1/2 Mouse mAb与p44/42 MAPK (Erk1/2)Rabbit mAb 对正常小鼠心脏组织进行免疫
案例一:DAB染色后切片着色一片黄/背景深 背景:奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验,许多从北京购买的试剂买不到,对我们的许多实验产生了很大的影响。 我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒,效果不错,在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验,第一批组化实验结果很好,抗体浓度感觉比较合适(Santa Cruz公司1:200),等做第二批时发现封闭血清不够了,为了保证实验顺利进行,我又从福州迈新顶了一个SP试剂盒,同时抗体稀释液也不够了,我又重新从博士
。6)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。7)滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。8)PBS洗三次每次2分钟。9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃ 20 分钟。10)PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11)滴加试剂SABC,20℃~37℃ 20 分钟。12)PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13)DAB 显色:DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色(镜下掌握显色程度)。14)蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15)脱水、透明
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