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100
- 英文名:
T4 RNA Ligase
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20°C
- 规格:
20
产品名称:T4 RNA连接酶
英文名称:T4 RNA Ligase
分子量:43.6kDa,单体
级别:BR
来源:含有T4噬菌体克隆基因63的大肠杆菌
浓度:10u/ul
活性定义:是指在37℃、30分钟内将1nmol 5'-[32P]-(A)12-18转化为磷酸酶抗性形式所需的酶量
酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端)
保存液组分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5mM ELUGENT变性剂和50%(v/v)甘油
10×反应缓冲液:500mM HEPES-NaOH(PH8.0,25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT
抑制剂:金属螯合剂、SH基团修饰试剂
失活:70℃加热10分钟
质量控制:测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
备注:反应体系中ATP的浓度取决于连接反应的类型,推荐的BSA反应浓度是0.1mg/ml
性状(以下信息仅供参考):重组酶,催化ATP依赖的分子内和分子间磷酸二酯键连接(5'-磷酸基团和3'-羟基末端),底物分子为多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA,分子之间的最小的连接底物是核苷3',5'-二磷酸,而分子内连接的最小底物是8个碱基的寡核苷酸。配套提供反应缓冲液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羟基末端连接。作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。随酶提供10X 反应缓冲液
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)连接RNA和RNA ;RNA3'-末端标记胞嘧啶3',5'-双[a-32P]磷酸; tRNA的特异性修饰;合成寡核苷酸的环化;寡聚脱氧核糖核苷酸与单链cDNA连接,用于5'RACE(快速扩增cDNA末端)分析
保存: -20°C
T4 RNA连接酶产品优势:
※种类齐全,我司提供各种生化试剂,包括电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、培养基、缓冲剂、生化标准品试剂、生化质控品试剂、分离材料等;
※现货供应,我司的试剂产品主要以现货直销为主,当天下单当天即发货(供应不足则需要几天周转);
※价格公允,我司产品价格以市场公允价为准。(由于市场的不确定性,产品价格随时会变,本页面的报价仅供参考,准确的实时报价请以电询为准。)
※服务灵活,我司的服务贯穿整个订购流程,包括收到货后的实验过程,我们不仅提供退换货服务,还有技术咨询服务。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多,也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题,就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与,如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
使RNA的 3′- OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6. 5. 1. 3.是 J. Hurwitz等( 1972)从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的,与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理,首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体,复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键,它与 RNA的 3′- OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
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