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上海康朗生物科技有限公司
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10
外泌体(Exosome)是直径约为30-150nm,密度在1.13-1.21g/m1的小囊泡。Exosome天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳,外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性囊泡。
外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)研究发现,Exosome内含有与细胞来源相关的蛋白质rRNA和microRNA,并且exosome能够通过生物屏障,在细胞间传递功能性核酸分子,从而发挥各种生物学功能。
外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)服务内容:
1,外泌体提取服务
从体外培养的细胞中分离和提取exosome的主要方法是超速离心法,这种方法缺点也不少:耗时耗力,往往需要30个小时左右;每次最多只能处理6个样品;需要大量的起始材料;产量不高。
我公司自主开发外泌体快提取试剂盒,快速高效获得高纯度外泌体颗粒。
- 外泌体电镜检测服务
全血,血浆;
细胞上清液;
体液:尿液、心包积液、唾液、脑脊液、腹水等。
用于分离外泌体类型及所需量:
血清样本: 5ml (全血10ml);
血浆样本: 5ml (全血 8-10ml);
无血清培养细胞上清:50ml;
体液: 20ml;
外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)外泌体粒径检测服务
来自细胞培养上清液提取的外泌体,通过美国PSS Nicomp 380 Z3000粒度仪检测
3,外泌体基因、蛋白检测分析服务
外泌体microRNA检测分析;
外泌体lncRNA检测分析;
外泌体蛋白表达检测分析;
4,外泌体NSG测序服务
外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)相关产品
外泌体提取纯化试剂盒;
Cd63-GFP真核表达质粒;
Cd63-GFP腺病毒颗粒;
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文献和实验外泌体(Exosomes)是细胞分泌到胞外的一种囊泡,大小为 30-150 nm,携带了各种核酸、蛋白质和脂类等物质,可以在不同细胞间进行传递和交流,从而影响受体细胞的生物学功能。 肿瘤细胞来源的外泌体不仅能帮助肿瘤细胞自身发生侵袭和转移,也能促进肿瘤微环境其他细胞的状态发生改变。外泌体在肿瘤中起的作用若要深入研究,这就需要我们拿到更多的肿瘤来源的外泌体。 目前肿瘤方向的研究多使用肿瘤细胞的培养上清来提取外泌体,但是现在我们可以直接利用肿瘤组织来提取外泌体,一方面减少了大量体外培养细胞
显著性最高。 图七 尿液外泌体中的脂类分析 五、以外泌体内蛋白质为标志物: 山东大学附属山东省肿瘤医院宋现让和谢丽课题组发表研究文章[5],揭示了非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清外泌体中的蛋白质可以作为潜在的诊断指标。 本文作者通过分离 46 个健康人和 125 个 NSCLC 患者血清的外泌体,发现与健康组相比,外泌体中 α2-HS 糖蛋白(AHSG)和细胞外基质蛋白 1(ECM1)表达显著升高,再结合肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)同时检测,可以提高诊断准确性。 图八
了外泌体中的脂质、RNA 和蛋白质,还有微囊泡、凋亡小体等囊泡类型的信息。 ExoCarta(http://exocarta.org/index.html)数据库主要收录了包括人、大鼠、小鼠、绵羊、豚鼠、果蝇、马、穴兔、牛在内的几个物种的 286 个研究结果,含蛋白质、mRNA、miRNA 和脂质等信息。 三、如何获得外泌体样本及预处理? 外泌体广泛存在于细胞培养上清以及各种体液中,包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等。不同的样本来源,预处理及注意细节均不同,下面
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