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外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)

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  • 外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-200 nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯状形态、双层膜结构,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞(免疫细胞、神经细胞、干细胞),都可以产生并释放exosome。目前外泌提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。
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  • 2025年07月07日
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      上海联迈生物工程有限公司

    • 服务名称

      外泌体提取

    • 规格

      10

    外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)是由不同细胞分泌的直径30-150nm 的胞外膜性囊泡(Extrocellular VisiclesEVs)。外泌体普遍存在于多种体液中,其内容物丰富,包括蛋白质、脂质和核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用。近年来,液体活检作为一种新的非侵入式主要检测血液中循环肿瘤细胞(Circulating Tumor CellCTC)和循环肿瘤DNA(Circulating Tumor DNActDNA),获取患者肿瘤病变信息,用以帮助诊断治疗。研究表明,在外泌体中已检测到基因组DNA 和线粒体DNA,通过提取和检测外泌体中DNA突变,可作为液体活检的另一种选择。
    产品细节图片1
    外泌体提取和DNA分离试剂盒(Exosome Extraction & DNA Isolation Kit)结合我们的外泌体提取试剂,能够从细胞培养上清或体液(血清/血浆等)中同时分离外泌体和循环DNA。利用优化的裂解液提取已分离的外泌体DNA,采用吸附柱(Spin Columns)法方便、快捷地纯化、洗脱外泌体DNA,可直接用于下游应用,如real time PCRExpression Array AssaysNGS等。
    外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)产品特点:
    可获得回收率、高纯度游离DNA和外泌体相关DNA
    操作简单、快捷,不需要额外仪器设备。
    可小体积洗脱。
    适合后续各种DNA实验,如qPCR或数字
    产品应用:
    可简单、快速富集各种样本中游离DNA和外泌体颗粒。
    可通过DNase I处理降解样本中游离DNA,而外泌体中DNA不受影响,可单独纯化外泌体中DNA
    可应用qPCR或数字PCR检测和发现突变,应用于液体活检。
    外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)提取的DNA可用于构建文库及测序。
    收集临床诊断为肠癌患者,应用“外泌体提取和DNA分离试剂盒”中外泌体提取试剂沉淀血浆中外泌体颗粒,分别经过Dnase I处理和不经过Dnase I处理来区分提取的外泌体相关DNA,应用安捷伦2100 Bioanalyzer测定DNA分布图(图1),从中得出:外泌体提取试剂不仅能富集血浆中外泌体颗粒,同时血浆中游离DNA也能被沉淀下来,经过Dnase I消化,可以降解血浆中游离DNA,但外泌体膜性结构可阻止Dnase I对外泌体内含物DNA消化。以提取的DNA为模板,应用ARMS-PCR技术对KRas突变检测(图2),在KRas突变的肠癌患者中,检测的Ct值较健康人小,同时经过Dnase I处理,可提高肠癌患者与健康人Ct值差值(△Ct)检测的特异性和灵敏度。
    产品细节图片2
    外泌体提取和 DNA 分离(细胞培养上清或尿液)外泌体提取和DNA/RNA分离纯化方面积累了丰富经验,结合我们的实验条件,可以提供:
    1、外泌体的提取和纯化,外泌体定量(NTAELISA)。
    2、外泌体核酸分离和纯化,外泌体核酸检测(qPCRNGS)。
    3、外泌体蛋白质鉴定,如Western Blot,蛋白质质谱分析等。
     

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    相关实验
    • 肿瘤组织如何提取分离外泌体

      外泌体(Exosomes)是细胞分泌到胞外的一种囊泡,大小为 30-150 nm,携带了各种核酸、蛋白质和脂类等物质,可以在不同细胞间进行传递和交流,从而影响受体细胞的生物学功能。 肿瘤细胞来源的外泌体不仅能帮助肿瘤细胞自身发生侵袭和转移,也能促进肿瘤微环境其他细胞的状态发生改变。外泌体在肿瘤中起的作用若要深入研究,这就需要我们拿到更多的肿瘤来源的外泌体。 目前肿瘤方向的研究多使用肿瘤细胞的培养上清提取外泌体,但是现在我们可以直接利用肿瘤组织来提取外泌体,一方面减少了大量体外培养细胞

    • 外泌体的临床诊断价值,你知道多少?

      显著性最高。 图七 尿液外泌体中的脂类分析 五、以外泌体内蛋白质为标志物: 山东大学附属山东省肿瘤医院宋现让和谢丽课题组发表研究文章[5],揭示了非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清外泌体中的蛋白质可以作为潜在的诊断指标。 本文作者通过分离 46 个健康人和 125 个 NSCLC 患者血清的外泌体,发现与健康组相比,外泌体中 α2-HS 糖蛋白(AHSG)和细胞外基质蛋白 1(ECM1)表达显著升高,再结合肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)同时检测,可以提高诊断准确性。 图八

    • 如何用外泌体「套路」申请关于国自然?

      外泌体中的脂质、RNA 和蛋白质,还有微囊泡、凋亡小体等囊泡类型的信息。 ExoCarta(http://exocarta.org/index.html)数据库主要收录了包括人、大鼠、小鼠、绵羊、豚鼠、果蝇、马、穴兔、牛在内的几个物种的 286 个研究结果,含蛋白质、mRNA、miRNA 和脂质等信息。 三、如何获得外泌体样本及预处理? 外泌体广泛存在于细胞培养上清以及各种体液中,包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等。不同的样本来源,预处理及注意细节均不同,下面

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