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- 外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放exosome。目前外泌提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。
- 全国
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海联迈生物工程有限公司
- 服务名称：
外泌体提取
- 规格：
10
外泌体提取和DNA分离试剂盒（Exosome Extraction & DNA Isolation Kit）结合我们的外泌体提取试剂，能够从细胞培养上清或体液（血清/血浆等）中同时分离外泌体和循环DNA。利用优化的裂解液提取已分离的外泌体DNA，采用吸附柱（Spin Columns）法方便、快捷地纯化、洗脱外泌体DNA，可直接用于下游应用，如real time PCR，Expression Array Assays，NGS等。
外泌体提取和 DNA 分离（细胞培养上清或尿液）产品特点：
可获得回收率、高纯度游离DNA和外泌体相关DNA。
操作简单、快捷，不需要额外仪器设备。
可小体积洗脱。
适合后续各种DNA实验，如qPCR或数字
产品应用：
可简单、快速富集各种样本中游离DNA和外泌体颗粒。
可通过DNase I处理降解样本中游离DNA，而外泌体中DNA不受影响，可单独纯化外泌体中DNA。
可应用qPCR或数字PCR检测和发现突变，应用于液体活检。
外泌体提取和 DNA 分离（细胞培养上清或尿液）提取的DNA可用于构建文库及测序。
收集临床诊断为肠癌患者，应用“外泌体提取和DNA分离试剂盒”中外泌体提取试剂沉淀血浆中外泌体颗粒，分别经过Dnase I处理和不经过Dnase I处理来区分提取的外泌体相关DNA，应用安捷伦2100 Bioanalyzer测定DNA分布图（图1），从中得出：外泌体提取试剂不仅能富集血浆中外泌体颗粒，同时血浆中游离DNA也能被沉淀下来，经过Dnase I消化，可以降解血浆中游离DNA，但外泌体膜性结构可阻止Dnase I对外泌体内含物DNA消化。以提取的DNA为模板，应用ARMS-PCR技术对KRas突变检测（图2），在KRas突变的肠癌患者中，检测的Ct值较健康人小，同时经过Dnase I处理，可提高肠癌患者与健康人Ct值差值（△Ct）检测的特异性和灵敏度。
外泌体提取和 DNA 分离（细胞培养上清或尿液）外泌体提取和DNA/RNA分离纯化方面积累了丰富经验，结合我们的实验条件，可以提供：
1、外泌体的提取和纯化，外泌体定量（NTA和ELISA）。
2、外泌体核酸分离和纯化，外泌体核酸检测（qPCR或NGS）。
3、外泌体蛋白质鉴定，如Western Blot,蛋白质质谱分析等。
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文献和实验远远比常规试剂盒提取高，更好的保留外泌体的活性和形态； 大规模提取是有参考的解决方案的，这两篇文献很好的做了阐释。 关键步骤 [1]： ● 收集条件培养基（CM）：收集神经母细胞瘤 N2a 和成肌细胞 C2C12 的培养基，经过低速离心和 0.22 μm 过滤去除大颗粒和细胞碎片。 ● 处理大体积培养基：对于大体积培养基（50 ml 至 200 mL），使用切向流过滤（TFF）系统进行浓缩和透析，然后加载到结合-洗脱分子筛层析（BE-SEC）柱上进行纯化。 ● 分离 EVs：根据 280 nm
外泌体（Exosomes）是细胞分泌到胞外的一种囊泡，大小为 30-150 nm，携带了各种核酸、蛋白质和脂类等物质，可以在不同细胞间进行传递和交流，从而影响受体细胞的生物学功能。 肿瘤细胞来源的外泌体不仅能帮助肿瘤细胞自身发生侵袭和转移，也能促进肿瘤微环境其他细胞的状态发生改变。外泌体在肿瘤中起的作用若要深入研究，这就需要我们拿到更多的肿瘤来源的外泌体。 目前肿瘤方向的研究多使用肿瘤细胞的培养上清来提取外泌体，但是现在我们可以直接利用肿瘤组织来提取外泌体，一方面减少了大量体外培养细胞
培养基，添加新培养基（50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基）； 3. 阶段培养二：待细胞在梯度培养一中生长汇合度约为 70～80% 时，移去原有的 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基； 4. 使用 1X PBS 溶液将细胞润洗 2～3 次； 5. 加入外泌体专用无血清培养基继续培养 24～48 h，待细胞汇合度到 90%～100% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌体提取实验。 *注：若使用 DMEM、1640 等常规培养基，会导致培养的细胞
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