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- 外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放exosome。目前外泌提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。
- 全国
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海联迈生物工程有限公司
- 服务名称：
外泌体提取
- 规格：
10
外泌体提取和DNA分离试剂盒（Exosome Extraction & DNA Isolation Kit）结合我们的外泌体提取试剂，能够从细胞培养上清或体液（血清/血浆等）中同时分离外泌体和循环DNA。利用优化的裂解液提取已分离的外泌体DNA，采用吸附柱（Spin Columns）法方便、快捷地纯化、洗脱外泌体DNA，可直接用于下游应用，如real time PCR，Expression Array Assays，NGS等。
外泌体浓缩试剂盒（细胞培养上清）产品特点：
可获得回收率、高纯度游离DNA和外泌体相关DNA。
操作简单、快捷，不需要额外仪器设备。
可小体积洗脱。
适合后续各种DNA实验，如qPCR或数字
产品应用：
可简单、快速富集各种样本中游离DNA和外泌体颗粒。
可通过DNase I处理降解样本中游离DNA，而外泌体中DNA不受影响，可单独纯化外泌体中DNA。
可应用qPCR或数字PCR检测和发现突变，应用于液体活检。
外泌体浓缩试剂盒（细胞培养上清）提取的DNA可用于构建文库及测序。
收集临床诊断为肠癌患者，应用“外泌体提取和DNA分离试剂盒”中外泌体提取试剂沉淀血浆中外泌体颗粒，分别经过Dnase I处理和不经过Dnase I处理来区分提取的外泌体相关DNA，应用安捷伦2100 Bioanalyzer测定DNA分布图（图1），从中得出：外泌体提取试剂不仅能富集血浆中外泌体颗粒，同时血浆中游离DNA也能被沉淀下来，经过Dnase I消化，可以降解血浆中游离DNA，但外泌体膜性结构可阻止Dnase I对外泌体内含物DNA消化。以提取的DNA为模板，应用ARMS-PCR技术对KRas突变检测（图2），在KRas突变的肠癌患者中，检测的Ct值较健康人小，同时经过Dnase I处理，可提高肠癌患者与健康人Ct值差值（△Ct）检测的特异性和灵敏度。
外泌体浓缩试剂盒（细胞培养上清）外泌体提取和DNA/RNA分离纯化方面积累了丰富经验，结合我们的实验条件，可以提供：
1、外泌体的提取和纯化，外泌体定量（NTA和ELISA）。
2、外泌体核酸分离和纯化，外泌体核酸检测（qPCR或NGS）。
3、外泌体蛋白质鉴定，如Western Blot,蛋白质质谱分析等。
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文献和实验离心管浓缩 3-5 倍（超滤柱上层液体即为浓缩后的样品），准备 50 mL 以上的浓缩液再使用本试剂盒提取外泌体。 8、细胞上清液的浓缩倍数该如何选定？ 由于不同细胞在不同培养条件下外泌体分泌量差异较大，因此针对上清液的浓缩倍数无法给出具体数值。建议先选定一个倍数进行样品浓缩，以外泌体纯化过程中EPF柱堵柱现象作为浓缩倍数是否合适的依据，如果 EPF 柱出现堵柱现象，则可适当降低超滤浓缩倍数。 9、加了 ECS 液离心之后无沉淀，这个现象正常吗？ 由于某些细胞（如悬浮细胞、干细胞、免疫细胞、神经细胞
文献中常用的分离外泌体的方法主要是超离法和试剂盒法，那这两种方法研究人员该如何选择呢？为了解决大家的疑惑，我们专门做了对比实验进行阐述。 四、超速离心法与试剂盒法比较 （一）实验分组和开展实验确定： 此实验共分为 3 组，每组设置 2 个重复，所选原始样本是 293T 细胞培养上清。 组1：超离法分离（UC-1，UC-2）； 组2：使用某国外试剂盒 SXX（SXX-1，SXX-2）； 组3：使用某国内试剂盒 UXX（UXX-1，UXX-2）。 开展
到了细胞上清液时，依次离心去除细胞、细胞碎片后进行存储；通过超滤方法浓缩上清液体积，提高外泌体浓度；最后通过超离或者试剂盒的方法提取外泌体。 以上的方法针对制备科研级别的外泌体质量会大有提升，如果要针对大规模（几升以上）的则需要结合其他的方法来操作。 文章图文来源：宇玫博生物
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