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- 外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放exosome。目前外泌提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。
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- 2025年07月15日
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- 提供商：
上海联迈生物工程有限公司
- 服务名称：
外泌体提取
- 规格：
10
外泌体提取（细胞培养上清或尿液）是由不同细胞分泌的直径30-150nm 的胞外膜性囊泡(Extrocellular Visicles，EVs）。外泌体普遍存在于多种体液中，其内容物丰富，包括蛋白质、脂质和核酸等，在细胞间信息交流中发挥着重要作用。近年来，液体活检作为一种新的非侵入式主要检测血液中循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，CTC）和循环肿瘤DNA(Circulating Tumor DNA，ctDNA)，获取患者肿瘤病变信息，用以帮助诊断治疗。研究表明，在外泌体中已检测到基因组DNA 和线粒体DNA，通过提取和检测外泌体中DNA突变，可作为液体活检的另一种选择。
外泌体提取和DNA分离试剂盒（Exosome Extraction & DNA Isolation Kit）结合我们的外泌体提取试剂，能够从细胞培养上清或体液（血清/血浆等）中同时分离外泌体和循环DNA。利用优化的裂解液提取已分离的外泌体DNA，采用吸附柱（Spin Columns）法方便、快捷地纯化、洗脱外泌体DNA，可直接用于下游应用，如real time PCR，Expression Array Assays，NGS等。
外泌体提取（细胞培养上清或尿液）产品特点：
可获得回收率、高纯度游离DNA和外泌体相关DNA。
操作简单、快捷，不需要额外仪器设备。
可小体积洗脱。
适合后续各种DNA实验，如qPCR或数字
产品应用：
可简单、快速富集各种样本中游离DNA和外泌体颗粒。
可通过DNase I处理降解样本中游离DNA，而外泌体中DNA不受影响，可单独纯化外泌体中DNA。
可应用qPCR或数字PCR检测和发现突变，应用于液体活检。
外泌体提取（细胞培养上清或尿液）提取的DNA可用于构建文库及测序。
收集临床诊断为肠癌患者，应用“外泌体提取和DNA分离试剂盒”中外泌体提取试剂沉淀血浆中外泌体颗粒，分别经过Dnase I处理和不经过Dnase I处理来区分提取的外泌体相关DNA，应用安捷伦2100 Bioanalyzer测定DNA分布图（图1），从中得出：外泌体提取试剂不仅能富集血浆中外泌体颗粒，同时血浆中游离DNA也能被沉淀下来，经过Dnase I消化，可以降解血浆中游离DNA，但外泌体膜性结构可阻止Dnase I对外泌体内含物DNA消化。以提取的DNA为模板，应用ARMS-PCR技术对KRas突变检测（图2），在KRas突变的肠癌患者中，检测的Ct值较健康人小，同时经过Dnase I处理，可提高肠癌患者与健康人Ct值差值（△Ct）检测的特异性和灵敏度。
外泌体提取（细胞培养上清或尿液）外泌体提取和DNA/RNA分离纯化方面积累了丰富经验，结合我们的实验条件，可以提供：
1、外泌体的提取和纯化，外泌体定量（NTA和ELISA）。
2、外泌体核酸分离和纯化，外泌体核酸检测（qPCR或NGS）。
3、外泌体蛋白质鉴定，如Western Blot,蛋白质质谱分析等。
外泌体提取和DNA分离试剂盒（Exosome Extraction & DNA Isolation Kit）结合我们的外泌体提取试剂，能够从细胞培养上清或体液（血清/血浆等）中同时分离外泌体和循环DNA。利用优化的裂解液提取已分离的外泌体DNA，采用吸附柱（Spin Columns）法方便、快捷地纯化、洗脱外泌体DNA，可直接用于下游应用，如real time PCR，Expression Array Assays，NGS等。
外泌体提取（细胞培养上清或尿液）产品特点：
可获得回收率、高纯度游离DNA和外泌体相关DNA。
操作简单、快捷，不需要额外仪器设备。
可小体积洗脱。
适合后续各种DNA实验，如qPCR或数字
产品应用：
可简单、快速富集各种样本中游离DNA和外泌体颗粒。
可通过DNase I处理降解样本中游离DNA，而外泌体中DNA不受影响，可单独纯化外泌体中DNA。
可应用qPCR或数字PCR检测和发现突变，应用于液体活检。
外泌体提取（细胞培养上清或尿液）提取的DNA可用于构建文库及测序。
收集临床诊断为肠癌患者，应用“外泌体提取和DNA分离试剂盒”中外泌体提取试剂沉淀血浆中外泌体颗粒，分别经过Dnase I处理和不经过Dnase I处理来区分提取的外泌体相关DNA，应用安捷伦2100 Bioanalyzer测定DNA分布图（图1），从中得出：外泌体提取试剂不仅能富集血浆中外泌体颗粒，同时血浆中游离DNA也能被沉淀下来，经过Dnase I消化，可以降解血浆中游离DNA，但外泌体膜性结构可阻止Dnase I对外泌体内含物DNA消化。以提取的DNA为模板，应用ARMS-PCR技术对KRas突变检测（图2），在KRas突变的肠癌患者中，检测的Ct值较健康人小，同时经过Dnase I处理，可提高肠癌患者与健康人Ct值差值（△Ct）检测的特异性和灵敏度。
外泌体提取（细胞培养上清或尿液）外泌体提取和DNA/RNA分离纯化方面积累了丰富经验，结合我们的实验条件，可以提供：
1、外泌体的提取和纯化，外泌体定量（NTA和ELISA）。
2、外泌体核酸分离和纯化，外泌体核酸检测（qPCR或NGS）。
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文献和实验相关实验
高质量尿液外泌体如何提取
细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程 1.核对样本 2.离心，3000g，15min； 3.离心后样本（有略微沉淀） 4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂; ECS 与试剂有明显分层； 震荡混匀； 5.在 4 度冰箱静置 2H 以上，离心 10000g，60min； 6.离心后的样本（沉淀明显，沉淀中富含外泌体） 将上清吸出留下沉淀，将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液； 7.加 PBS 重悬沉淀； 用 PBS 洗脱后的沉淀 8.离心进一步去除
碎片物，这时候的上清液就可以进行保存了。短期 3 ~ 4 天左右使用的话，则可以放到 4℃ 的冰箱中，而长期个把月后使用的话，则在 -80℃ 进行保存，使用前取出来 4℃ 自然融化即可。那么这些离心操作是否可以不做呢？不可以的。细胞上清液处理的越早越好，处理晚时存留细胞会坏死而破碎，更多的胞内囊泡就会释放出来了，这时候的样品就更加的复杂了，更不利于后期的研究了。 然后，针对细胞上清液的初步浓缩。之前在做技术答疑时，并没有建议做初步的浓缩操作，但是后来越来越多的同学遇到在细胞外泌体提取过程中无论采取
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外泌体提取（细胞培养上清或尿液）
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