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上海联迈生物工程有限公司
- 服务名称:
外泌体提取
- 规格:
50次
乙型肝炎病毒核酸快速检测试剂盒(磁珠法)
产品介绍
在临床上HBV不仅可引起人类急性肝炎、 慢性肝炎、肝硬化和成为无症HBsAg携带者,还可以引起细胞转化或诱发肝癌。HBV携带者中50%~ 70%病毒复制活跃,为慢性乙型肝炎。慢性乙型肝炎病人肝硬化发生率为2% ~ 20 %,20% ~ 23%代偿性肝硬化发展成失代偿性肝硬化,发展成肝癌的占6% ~ 15%。乙型肝炎作为一种流行久远、传播广泛、危害严重的传染性疾病,其防治尤为重要。
润基生物在BMD-PCR技术平台基础上开发的乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒,采用超顺纳米磁珠富集样本中的微量HBV DNA分子,操作简单且反应迅速,融汇省时高效的扩增体系,实现超敏感、宽线性范围、可重复性好、抗干扰能力强的HBV DNA定量溯源的PCR检测,真正满足临床诊治的本质需求。
产品特点
1、反应迅速:核酸扩增全程反应仅需30min(40个循环),同时保证较高的准确性和灵敏度,很大程度的提高了临床工作效率。2、超顺纳米磁珠法:采用超顺纳米磁珠富集样本中微量的核酸分子,磁珠吸附效率高,杂质去除效果好,抗干扰能力强,能够胜任溶血、血脂、黄疸等复杂样本,实现高精度检测;
3、内标全程监控:内标全程参与核酸的提取、纯化和扩增,实现全程监控,避免假阴性结果的发生,内标来源于标本本身,不同于质粒或假病毒颗粒;
4、灵敏度高:最低检出限为25 IU/mL,能够很好的满足国际、国内肝病指南对丙肝临床诊疗的需求,为丙肝患者走好个体化的抗病毒优化治疗之路提供高精度的导航服务;
5、可全自动化:实现检测的全自动,避免人工操作误差,提高工作效率和准确性,实现实验室检测的标准化。
产品参数
- 最低检测线
20IU/mL - 线性范围
20-1×109IU/mL - 覆盖基因型
A-H基因型 - 样本类型
血清、血浆等 - 样本用量
200uL - 技术平台
磁珠法、BMD-PCR - 产品证书
性能评估
线性范围(20-20×109IU/ml)
精密度(高低精密度分别是0.69%和0.17%)
最低检出限10IU/ml
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文献和实验的磁珠纯化方案正在逐步替代以往的各种方法,特别是目前普遍应用的离心柱法。 酚法抽提、玻璃珠沉淀法、离心柱法与磁珠法: 经典的核酸纯化法采用酚、氯仿抽提,样品经过处理后分为水相和有机相,通过酒精离心沉淀水相中核酸的方法纯化样品中的核酸,这就是我们所说的酚-率氯仿抽提法。酚法抽提相对稳定,至今仍被多数科技工作者广泛应用,也是其他多种提取方法的操作基础。 随后,科学家发现核酸与硅存在特异结合,并开发了用玻璃珠吸附核酸,离心沉淀后经过洗和洗脱得到纯化的核酸样品,因玻璃珠比重较大,容易
过滤孔,导致膜的寿命减短,分离效率较低。同时,外泌体会粘附在膜上,导致产量降低。 免疫磁珠法:用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。该方法分离得到的外泌体的生物活性易受 pH 和盐浓度影响,不利于下游实验。 试剂盒分离法:目前商业化的外泌体提取试剂盒多种多样,提取效果良莠不齐。同时试剂盒本身的价格比较高,且外泌体的得率和纯度一般,不是性价比高的一种分离方法。此方法得到的外泌体对于后续的鉴定实验、细胞实验和动物实验等可能有影响。 五、如何鉴定外泌
, 也 有依据分子大小分离得到cffDNA, 还有用肽核酸来 富集得到cffDNA序列 综上所述, 传统苯酚–氯仿抽提法, 虽操作复 杂、特异性差, 但提纯效率较好, 改良后是一种高效、 廉价的富集方法; 微柱吸附法, 操作简便、DNA纯 度相对较高、重复性好, 但成本相对较高, 而且对小 片段DNA丢失较严重; 磁珠法采用磁珠吸附, 磁场 分离的原理, 操作简便、快速、DNA纯度高, 特别适 合小片段eoDNA的富集。 eoDNA被认为是检测肿瘤组织的一种替代标 记
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