DNA梯度分子量标准（50-1500bp）

PCR 不必“摸条件”

bp 片段，以 pBS 菌液为模板扩增 1500 bp 片段。 模板：菌液 OD600=0.8 时 2 μL /50 μL PCR 扩增程序：同上 a 扩增程序同。 结果：Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix 试剂对于质粒或菌液均可高效率的扩增。取扩增产物 10 μL 用 1% 琼脂糖凝胶电泳进行分析可见明亮条带。 二、genomic DNA扩增 1．大肠杆菌DNA扩增 模板：大肠杆菌DNA 50 ng/50 μL PCR扩增程序： 循环数 Step 温度

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

离 0.1-25 kb 范围内的核酸分子。聚丙烯酰胺形成的孔径较小，可用于分离小于1 kb 的核酸分子。某些情况下，可采用聚丙烯酰胺凝胶以获得片段小于 100 bp 的单碱基分辨率[1]。 表 1. 琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶之间的差异 2. 准备标准品和样品 a .核酸标准品选择 当运行凝胶时，含有已知大小的核酸参照样品通常被称为标准品、标记或分子量标准，用于目的样品大小的估计。在为给定样品选择合适的分子量标准时，需考虑如下因素: Ladde 类型（例如 DNA 或 RNA），片段结构(例如单链或双链

【求助】基因检测，极度困难，十分无助，请帮忙

wymderek 本人目前在做肺癌基因检测，靶标方面的研究，手上的标本均为05---08年肺穿刺、气管镜的组织标本，既往曾经过福尔马林固定，石蜡包埋等处理，切片后行LCM（显微切割）选出肿瘤区域。 小片组织细胞数约为50个细胞，我们的后续方法为从这样的标本组织中提取DNA（应用蛋白酶水解过夜，在蛋白酶失活方法，经过验证新近标本，均可成功），然后巢式PCR扩增，最后测序比对可能出现的突变或者缺失。 我们检测的基因为EGFR