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- 英文名：
Klenow酶
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- 供应商：
嵘崴达
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250 UNITS
Klenow酶
Sequencing grade, from Escherichia coli Iysogenic for NM 964
别名:
Klenow
一般描述
Klenow酶是大肠杆菌（E.coli）DNA聚合酶I的C末端大片段（Mr 76,000），可通过使用枯草杆菌蛋白酶处理完整的DNA聚合酶I而获得。它保留了完整DNA聚合酶I的5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性，但缺乏天然酶的5′→3′核酸外切酶活性。该酶能够催化脱氧核苷-5′-三磷酸的单核苷酸添加至引物/模板DNA的3′-羟基末端。这一特性可用于合成与单链DNA模板互补的DNA。Klenow酶是使用枯草杆菌蛋白酶处理完整的DNA聚合酶I而获得的。
应用
Klenow酶已用于将recyclin-1（RCY1）基因钝端连接到pETDUET-GSTHis6-S Tag载体中。质量
功能测试：根据Sanger在测序反应中对测序级Klenow酶进行测试。用1单位酶和M13测序系统进行测试。通过放射自显影检查测序凝胶。可读序列必须是≥250碱基。无污染物：已经在各种DNA底物上对测序级Klenow酶进行了测试，确保不存在非特异性内切核酸酶和核酸外切酶。
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文献和实验酶组织化学酶显示方法 1．偶联偶氮色素法 此法又称偶氮色素法(couplingazo dyemethod)，是指用某种人工合成底物在酶作用下产生分解产物，分解产物与重氮盐结合，引起偶联偶氮反应，形成不溶性偶氮色素，以此对酶定位。常用的底物是萘酚系列化合物，如l―萘酚、2―萘酚、6―溴―2―萘酚、萘酚AS、萘酚AS衍生物等。由于重氮盐的种类不同，偶氮色素的颜色也不同，可显示出紫色、蓝色、红色、褐色、棕色和黑色等各种颜色。 重氮盐有不同程度的抑制酶活性作用，因此必须选择抑制作用最弱
存在于胎盘、马睾丸等微粒体部分，使△4 -3- 氧甾醇的 A 环芳构化，变成酚型酶。开始是 19 位的甲基由 19- 羟化酶进行二次羟化成为二羟化物，接着脱水形成 19- 氧代化物，然后，在 10 位与 19 位之间切断的同时失去 1 位与 2 位的氢而成为醌，烯醇化后生成酚。因此，此系统由 19- 羟化酶与 C 10 -C 19 裂解酶构成，均需要分子态氧与 NADPH 。
Radiolabeling of DNA with the Klenow Fragment of DNA Polymerase
The Klenow fragment of DNA polymerase I is a proteolytic fragment obtained by the treatment of DNA polymerase I with subtilisin. The fragment still has the polymerase and 3′–5′ exonuclease activity, but lacks the 5′–3′ exonuclease activity
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