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- 2025年07月15日
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LR Clonase™ II Plus 酶
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20 次反应
LR Clonase™ II Plus 酶
货号 12538120
Gateway® LR Clonase® 酶混合物包含 Int（整合酶）、IHF（整合宿主因子）和 Xis（切除酶）酶的专有混合物，这些酶催化入门克隆（包含带有 attL 位点的目标基因）和目标载体（包含 attR 位点）之间的体外重组，以生成表达克隆。我们提供不同规格的 LR Clonase 酶混合物，具体取决于您的应用和所需规格。LR Clonase II Plus 酶混合物是可提供可用较高重组效率的较新版本（表 1），并针对单片段和多片段克隆进行专门优化（表 1）。LR Clonase II Plus 酶混合物以酶和反应缓冲液的优化单一混合物形式提供，以单片段和多片段克隆的少量移液步骤确保酶的稳定性和易用性。LR Clonase II 酶混合物也供应单混合物形式，原始 LR Clonase® 酶是独立试管中的酶和缓冲液
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主要经营的试剂品牌：
Roche试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
GE试剂，耗材，部分常用现货，周二，周五定货，3周左右。
SIGMA试剂，周一，五定货，3周左右到货。
R&D试剂，周一定货，3-4周到货。
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ABCAM试剂，国内现货三天左右，期货四周左右。
Peprotech试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
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OXOID，BD培养基货期八周左右，部分现货。
MCE激动剂，ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。 （2）混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体以及Gateway LR Clonase酶，构建表达克隆。（表达克隆用来在合适的宿主中进行蛋白的表达和分析。） 有几种方法可以构建Gateway入门克隆。无论您选择何种方法，创建的入门克隆都是准备用来与各种目的载体进行重组。 （1）PCR克隆（定向TOPO克隆至入门载体或与供载体B×P重组） （2）限制性内切酶消化和连接进入入门载体 （3）使用pCMV•SPORT6或pEXP-AD502*构建
Inducible shRNA Lentiviral Vectors
TE Buffer, pH 8.0 to 8 µl 5 µl 2) Remove the LR Clonase™ II enzyme mix from -20° C and thaw on ice (~ 2 minutes). 3) Vortex the LR Clonase™ II enzyme mix
-iT®病毒，病毒编码靶定荧光素酶（对照）或者Lamin A/C 的shRNA。转导5天后，细胞裂解物进行western blot，使用抗Lamin或者抗β-actin抗体检测。靶定Lamin的shRNA抑制了lamin的表达，但是却不影响β-actin的表达。对照荧光素酶的shRNA对lamin的表达没有影响。 图10 使用pLenti6/ BLOCK-iT™-DEST RNAi载体 使用LR Clonase™ II酶混合物进行一小时的重组
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