Ⅰ型胶原包被的4孔培养玻片

短时间获得更长活细胞成像的 4 个技巧

，因此务必使用中心区域的孔，并避免使用边缘附近的孔影响稳定性。比如说，使用的是 96 孔板（12×8 孔），就只使用中心的 60 孔（10×6 孔）进行实验。 图 1.载物台上式培养箱   2.通过创造稳定的环境温度改善聚焦效果 需要考虑的因素是室内温度，细微的温度变化也会影响到成像性能。 显微镜的环境温度稳定性对于活细胞的高倍率观察尤其重要。由于高数值孔径观察的景深较浅，因此即使温度变化造成很小的Z漂移，系统也可能会因此离焦。 为了优化环境条件，开始实验之前请确保打开空调并保持室温稳定。另外为了提高

血管生成实验—肿瘤项目必做实验之一

了，那么就说明胶没加满，格子被放大了，那么胶就加多了，格子没发生什么变形，这才是刚刚加满下孔的状态。   2、凝胶 1）盖上ibidi血管生成载玻片的盖子。2）准备一个10cm的培养皿，放入浸过水的纸巾，制成一个湿盒。 3）将ibidi血管生成载玻片放入培养皿中，盖上培养皿盖。4）将整个培养皿放入培养箱中，静置30分钟左右，等待胶凝结。 5）等待同时准备细胞悬液。     3. 铺细胞 加入细胞的量直接影响实验结果，所以在正式实验开始之前，要对不同类型的细胞和使用数量进行预实验。获得最佳比例的细胞

正常大鼠唾液腺上皮细胞的培养

鼠尾胶原溶液放入冰浴中的青霉素小瓶，加入0.5ml的10×DMEM培养基。混匀后，再加入浓度为0.34 mol/L的NaOH 0.1ml快速混合（鼠尾胶原液的配制比例，按鼠尾胶原液与10×DMEM及0.34 mol/L NaOH三者的体积比为8:1:1配制），并立即加到24孔培养板中（每孔0.8ml），于37℃下放置30min； 5. 将配好的鼠尾胶原溶液涂布在预先灭菌处理过的盖玻片上，使其凝固； 6. 将鼠尾胶原包被的盖玻片放入24孔培养板内，用D-Hanks液平衡1h，备用；