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吉奥蓝图
细胞检测平台
可提供细胞增殖/细胞毒性、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移/细胞侵袭等细胞学检测技术服务。通过细胞学检测可以对目的基因的生理功能及其相互作用进行研究,是基础科研及药物研发中检测物质毒性、评估药物安全性及有效性、肿瘤的发生及增值等的重用手段。
分子检测平台
可提供反转录PCR 、荧光定量PCR 、定点突变、载体构建、种属鉴定、质粒提取等常规分子生物学技术服务,此外凭借分子平台专业团队多年经验积累,可开展基因编辑技术(CRSPR Cas9)、miRNA 靶基因的预测与验证、双荧光素酶报告基因检测等特色技术服务。分子检测广泛应用于科学研究及医疗诊断领域,为疾病的研究和诊断提
供更准确、更科学的信息和依据。为生物学和医学的各个领域,提供了一个强
有力的技术平台。
蛋白检测平台
可提供WB 、IHC 、IF 、IP/CO-IP 、ELISA 等免疫学检测服务。免疫学检测是根据抗原、抗体反应的原理,利用已知的抗原检测未知的抗体或利用已知的抗体检测未知的抗原,可以定性、定位和定量地检测某一特异蛋白。这些方法为科研人员在研究诸如细胞信号通路、生理过程调控、代谢调节等方面提供重要手段。'
病毒平台
可提供慢病毒包装、腺病毒包装、稳转细胞株筛选的技术服务。当代基因治疗研究的热门方法是将外源基因(癌基因、病毒基因)DNA 或 RNA 片段导入靶细胞或组织,研究靶基因的上调或抑制情况。有些基因本身有治疗作用,体外合成该基因导入体内使其表达丰度提高。病毒载体由于其具有高效的靶向特异性,被广泛选为基因导入介质系统,已成为当前基因治疗载体研究的热点。
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文献和实验以最火热的 p53 为例Step1 先找 p53 基因序列1. NCBI--输入 p53 并选择物种 human:tumor protein p53 [Homo sapiens (human)]https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene2. Ctrl+F,输入 sequence,快速定位(当然其实拉下去就是了),点击 Genebank3. 下载 p53 基因序列4. 用 SnapGene 软件打开序列,并简单了解每个元件最好是可以学一下 SnapGene 这个软件的使用
设计了 sgRNA 之后怎么办呢?还是这篇文章先讲一下这里的框架首先是实验设计Experimental design1. Target selection for sgRNA--选择靶点详情见:CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计 https://www.jianshu.com/p/ 8222f449cb442. Approaches for sgRNA construction and delivery.sgRNA 的合成和投递有两种方式:A)PCR;B)单独的 sgRNA
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充:设计 sgRNA 之后,需要对结果进行判断:但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选,我也不知道为什么,总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
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