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- 文献和实验
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- 库存:
271
- 英文名:
DiI-Ac-LDL
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
- 规格:
500μg
特别提示:包括DiI标记乙酰化低密度脂蛋白在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DiI标记乙酰化低密度脂蛋白
英文名称:DiI-Ac-LDL
产品货号:QN0290
产品规格:500μg
本品DiI-Ac-LDL是1,1’-双十八酯基-3,3,3,,3,四甲基-吲哚碳菁高氯酸盐标记的乙酰化低密度脂蛋白。它能用于鉴定和分离混合细胞群中的血管内皮细胞和巨噬细胞。当细胞被DiI-Ac-LDL标记后,脂蛋白就会被溶酶体酶降解并且DiI(荧光探针)会积累在细胞内膜中。标记了DiI-Ac-LDL的细胞生存活性不受影响。血管内皮细胞纯化培养物可以基于增加的代谢DiI-Ac-LDL利用荧光激活分类从复杂的初级培养物中进行分离。污染细胞(成纤维细胞、平滑肌细胞、周细胞、上皮细胞)将不会被标记。巨噬细胞能够从混合的细胞群中(包括血管内壁细胞)区分出来是因为它的标记更亮一些。
标记有DiI-Ac-LDL的内皮细胞较其它抗原标记的内皮细胞有较多的优势。一旦细胞被标记, 荧光探针(DiI)将不会被胰蛋白酶移除掉。低密度和汇合培养的血管内皮细胞都将被高效的标记。其它类型的细胞标记水平均达不到血管内皮细胞标记(除了巨噬细胞)。百奥莱博公司DiI-Ac-LDL均通过牛主动脉内皮细胞和小鼠巨噬细胞进行标记测验以确保结果的一致性。
实验步骤:
1. 在生长培养基中将DiI-Ac-LDL稀释至20-50ug/ml;
2. 将其加入到细胞中37 ºC温育4小时;
3. 去掉培养基;
4. 用无探针的缓冲液冲洗;
5. 通过荧光显微镜观察并/或者将细胞通过胰蛋白酶(或者EDTA)进行分类。
6. 荧光显微镜:用标准罗丹明激发进行观察 (或者建议用波长激发:549nm、发射:565nm)。如果需要,用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用*醇或*酮进行固定,因为DiI溶于有机溶剂。(仅供科研使用)
注意事项:长时间的储存后可能会产生沉淀,这种现象属于正常情况。溶液放入离心管中离心2分钟将沉淀除去即可。DiI-Ac-LDL不稳定,实验时最好现用现配,采用新鲜配置工作液。
储存条件:2~8℃避光保存,请勿冷冻
除了DiI标记乙酰化低密度脂蛋白,,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| QN0267 | 罗丹明标记鬼笔环肽 | 300T |
| QN0277 | L-高丝氨酸 | 1g |
| QN0281 | L-天门冬氨酸钠盐 | 25g |
| QN0287 | DiI标记氧化型低密度脂蛋白 | 500μg |
| QN0290 | DiI标记乙酰化低密度脂蛋白 | 500μg |
| QN0297 | 低密度脂蛋白 | 2mg |
| QN0309 | 玉米蛋白 | 25g |
| QN0311 | 植物血球凝集素P | 5mg |
| QN0312 | 鱼精蛋白硫酸盐 | 1g |
| QN0316 | γ-球蛋白 | 1g |
| QN0319 | FN纤粘连蛋白(来源人血) | 0.2mg/ml |
| QN0328 | 胶原蛋白Ⅰ型 | 1g |
| QN0329 | 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型 | 10mg/2ml |
| QN0330 | 人血清白蛋白 | 500mg|1g|5g |
| QN0332 | 卵清蛋白 | 10g|100g |
| QN0333 | 牛血清白蛋白 BSA-Ⅴ(不含脂肪酸) | 5g |
| QN0367 | 牛血清白蛋白 BSA-Ⅴ | 5g|25g|50g|100g|500g|5kg |
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文献和实验目的 在爪蟾卵母细胞中建立人类低密度脂蛋白受体基因的表达系统,此系统可被用于降血脂和抗动脉粥样硬化的研究。方法和结果 冰块麻醉爪蟾,切取卵巢,获得V、VI 期卵母细胞,经用1 g/ L 胶原酶孵育过夜除去卵母细胞外层的卵巢膜和滤泡膜,培养3 天后存活率仍可达95 %以上。用DiI 标记的低密度脂蛋白荧光配体测定膜上结合荧光,发现V、VI 期卵母细胞膜上未见有内源性低密度脂蛋白受体,如将人低密度脂蛋白受体的表达质粒p3. 7 低密度脂蛋白导入爪蟾卵母细胞核中,培养后用DiI 标记的低密度脂蛋白配体
主要分为两大类,第一类是 PKH67(绿色荧光)/PKH26(红色荧光),由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合,所以染色效果较好,应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料,包括DiI(橙色荧
蛋白质翻译后修饰 (Protein translational modifications,PTMs) 通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。这些修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解,几乎影响正常细胞生物学和发病机制的所有方面。因此,识别和理解 PTM 在细胞生物学和疾病治疗和预防的研究中至关重要。 看到一篇 Thermo Fisher的文章,关于翻译后修饰Post
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