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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
2年
- 英文名:
rattailtendon collagen type I
- 库存:
大量
- 供应商:
广州威佳科技
- 保存条件:
2-8度
- 规格:
10ml
货号:C8062
保存:4℃保存,切勿冻存,有效期为一年。
规格:10mg, 5mg/ml, 溶解于 0.006mol/L HAc, 无菌。
产品简介:
晶欣鼠尾胶原蛋白 I型(rattailtendon collagen type I)是通过 Birkedal-Hansen的方法,通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。本公司鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。
1,在使用晶欣鼠胶原蛋白I型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。
2,在 1mg/ml浓度以上,pH为7左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。
使用方法:
1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度: 1-5ug/cm2
以包被浓度为 2 ug/cm2 为例:用无菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。
按以下表格体积加到相应的培养器皿中:
表面积(cm2 ,每孔或每皿)
加入 0.012mg/ml 胶原的体积( ul )
96孔细胞培养板
0.3
50
24孔细胞培养板
1.9
300
12孔细胞培养板
3.8
600
6孔细胞培养板
9.5
1580
35mm细胞培养皿
8
1330
60mm细胞培养皿
21
3500
100mm细胞培养皿
55
9170
确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面,开盖在超净台上过夜晾干。也可以在室温放置 1小时后,用PBS洗3-4次后直接使用。包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。
2、三维胶原的制备
鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06×体积的0.1mol/L NaOH 来中和。
需要的溶液(均需要无菌、预冷):10×PBS(可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示)或 10×培养液,, 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L 乙酸(一般不用),双蒸水
A.不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100ul 10×PBS
或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
B.含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul 10×PBS或10×培养液,混匀(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。
注意事项:
鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。
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文献和实验又称速发型变态反应,在临床上最常见。特点是当第二次接触同种变应原后,常在数秒或数分钟内导致死亡;如在此阶段抢救及时,临床症状消失也快。参与反应的抗体是IgE,(免疫球蛋白E),补体不参与反应,故反应的结果只产生功能性障碍,不破坏细胞或组织,但常可引起过敏性休克。反应的发生有明显的个体差异。引起反应的抗原物质很多,如食物、屋尘、花粉、霉菌、人及动物的皮屑、羽毛、药物及其他化学物质等。变应原通过吸入、食入、注射或接触使机体致敏。目前认为,Ⅰ型变态反应的发生与血清中的IgE有直接
佚名 一、概念 Ⅰ型超敏反应在四型超敏反应中发生速度最快,一般在第二次接触抗原后数分钟内出现反应,故称速发型超敏反应(immediate hypersensitivity)或变态反应(allergy)。Von Pirquet提出变态反应一词,意指机体第二次接触相同抗原后所出现的改变了的反应。Richet和Portie将因多次注射动物抗血清所引起的异常
佚名 Ⅰ型变态反应又称过敏反应(anaphylaxis),因反应迅速,故又有速发型超敏反应(immediate hypersensitivity)之称。本型变态反应是通过抗原(致敏原)进入机体后与附着在肥大细胞和嗜碱性粒细胞上的IgE分子结合,并触发该细胞释放生物活性物质,引起平滑肌收缩、血管通透性增加、浆液分泌增加等临床表现和病理变化。 致敏原的种类
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