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    鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

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    鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

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      • 货号:

        C5062

      • 保存条件:

        2-8度

      • 供应商:

        广州威佳科技

      • 数量:

        大量

      • 英文名:

        rattailtendon collagen type I

      • 保质期:

        2年

      • 规格:

        10ml

      鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明
      货号:C8062
      保存:4℃保存,切勿冻存,有效期为一年。
      规格:10mg, 5mg/ml, 溶解于 0.006mol/L HAc, 无菌。
      产品简介:
      晶欣鼠尾胶原蛋白 I型(rattailtendon collagen type I)是通过 Birkedal-Hansen的方法,通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。本公司鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。
      1,在使用晶欣鼠胶原蛋白I型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。
      2,在 1mg/ml浓度以上,pH为7左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。
      使用方法:
      1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度: 1-5ug/cm2
      以包被浓度为 2 ug/cm2 为例:用无菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。
      按以下表格体积加到相应的培养器皿中:
      表面积(cm2 ,每孔或每皿)
      加入 0.012mg/ml 胶原的体积( ul )
      96孔细胞培养板
      0.3
      50
      24孔细胞培养板
      1.9
      300
      12孔细胞培养板
      3.8
      600
      6孔细胞培养板
      9.5
      1580
      35mm细胞培养皿
      8
      1330
      60mm细胞培养皿
      21
      3500
      100mm细胞培养皿
      55
      9170
      确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面,开盖在超净台上过夜晾干。也可以在室温放置 1小时后,用PBS洗3-4次后直接使用。包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。
      2、三维胶原的制备
      鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06×体积的0.1mol/L NaOH 来中和。
      需要的溶液(均需要无菌、预冷):10×PBS(可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示)或 10×培养液,, 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L 乙酸(一般不用),双蒸水
      A.不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100ul 10×PBS
      或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
      B.含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul 10×PBS或10×培养液,混匀(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。
      注意事项:
      鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。

      广州威佳科技有限公司:www.whiga.com.cn/
      • 联系人:陈小姐 /李先生电话:020-84224925
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      • 手机:13503013224
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    • 联系人:

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      试剂,技术服务,耗材,抗体,ELISA 试剂盒,细胞库 / 细胞培养,实验室仪器 / 设备

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      经销商,代理商

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