- ¥180 - 1850
- YBscience
- YB1499-100S
- 进口/国产
- 2025年07月12日
企业认证
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- 库存：
大量
- 英文名：
EGY48酵母菌感受态细胞
- 保质期：
三年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
10×100ul / 20×100ul
| 产品编码 | 产品名称 | 规格 | 说明书 | |
| YB1499-100S | EGY48感受态细胞 | 10*100ul | ||
| YB1499-100 | EGY48感受态细胞 | 20*100ul |
注意：-70℃，避免反复冻融，影响转化效率。
EGY48酵母菌感受态细胞
规格： 100ul
EGY48 Chemically Competent Cell 产品说明书
EGY48酵母菌感受态细胞
产品规格
EGY48： 10*100ul 保存条件：-80℃
PGADT7（control vector）：10ng/ul 10ul 保存条件： 4℃
Carrier DNA： 5ug/ul 120 ul 保存条件： 4℃
PEG/liAC： 5 ml 保存条件： 4℃
DMSO： 300 ul 保存条件： 4℃
EGY48酵母菌感受态细胞
基因型MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2
产品简介：
产品说明
EGY48感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株，MATα型，可转化质粒或mating操作。Transformation marker为: his3, trp1, ura3 ，报告基因为：LEU2 。经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/ug DNA。
EGY48酵母菌感受态细胞
操作方法
1. 取100 ul冰上融化的EGY48感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5ug，Carrier DNA（95-100度5min,快速冰浴，重复一次）12 ul ，PEG/liAC 500ul并吸打几次混匀，30度水浴30 分钟（15 min翻转6-8次混匀）。
2. 加入DMSO 30ul 轻轻混匀。
3. 将管放42度水浴15min （7.5 min翻转6-8次混匀）。
4. 5000 rpm 离心 40s 弃上清，ddH2O 400ul 重悬，离心 30s 弃上清。
5. ddH2O 50ul重悬，涂板。
EGY48酵母菌感受态细胞注意事项
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验体积无水乙醇;1/10体积3.0M NaAc(pH5.2)，于-20℃静置过夜。 13. 离心12500xg×20min，4℃，去除上清，沉淀用70%乙醇洗涤，超净台风干。 l)，保存于-20℃。mg/管(用于1次转化反应，约40m14. 干燥的DNA溶于适量体积TE，定量，分装100-200 构建于DNA-BD载体的目的DNA转化酵母感受态细胞 1. 将酵母菌EGY48(p8op-lacZ)接种于5.0ml SD/-Ura液体培养基中，缓振打散菌落
取质粒DNA，酶切鉴定。 （3）用pLexA-靶DNA与pB42AD-库DNA一一对应、共转化只含有报告基因的酵母菌EGY48中，先到SD/-His/-Trp/-Ura板扩增，并与后面的诱导板形成对照，说明报告基因的表达与诱导AD融合蛋白的表达有关，再确证LacZ、Leu报告基因的表达。 （4）扩增与靶DNA相互作用的文库DNA，进行序列分析及进一步的结构、功能研究。5. 对双杂交系统阳性结果的进一步研究 （1）用不同的双杂交系统验证 将载体 pLexA与pB42AD互换后进行双杂交实验
Two-hybrid analysis of genetic
bait plasmid and a URA3 lacZ reporter plasmid like pSH18-34.The strain expressing the activation domain-tagged protein (prey strain)is EGY48 (MATa ura3 his3 leu2::3LexAop-LEU2 trp1 LYS2)transformed with the TRP1 prey plasmid.Patches of these two strains
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