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大量
- 英文名:
拟南芥种子
- 保质期:
1-2年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1管
| 产品货号 | 产品名称 |
| YB00220 | 拟南芥种子 |
拟南芥种子基本信息:
产品类型:哥伦比亚野生型
保存条件:室温,也可以放置在4℃冰箱内。
基本应用:转基因实验
拟南芥种子产品简介:
拟南芥(Arabidopsis thaliana)又名鼠耳芥,阿拉伯芥,阿拉伯草,十字花科植物,被子植物门,双子叶植物纲。其基因组大约为12500万碱基对和5对染色体。拟南芥是二年生草本植物,优点是植株小、结籽多。拟南芥的基因组是目前已知植物基因组中最小的。拟南芥是自花授粉植物,基因高度纯合,用理化因素处理突变率很高容易获得各种代谢功能的缺陷型。正是这些优点,让拟南芥成为遗传学研究的好材料,“植物中的果蝇”。在生物实验中拟南芥经常被选择作为模式植物,原因有三:首先,拟南芥只有5对染色体,数目很小;其次,拟南芥发育生长周期极快,在短期内就能繁育很多代,满足变异和进化的要求,最后拟南芥每次生产数千枚种子满足遗传上统计的要求。拟南芥无菌培养,最普遍使用的是1倍或0.5倍浓度的MS培养基,也有使用GamborgB5培养基。
拟南芥种子操作步骤:
1. 取保存的野生型种子适量,倒入1.5ml的离心管中,加入无菌水,震荡数次,高速离心15s,将上清及漂浮的种子弃掉。
2. 向离心管中加入1ml的 70%乙醇,震荡10s,用移液器小心地移除上清。
3. 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O,震荡后吸除,重复两次。
4. 向离心管中加入1ml的3%次氯酸钠溶液,在涡旋振荡器上强力震荡10min,用移液器小心地移除上清。
5. 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O,震荡后吸除,重复3次以上。
6. 向离心管中加入500μl的无菌去离子水ddH2O,震荡后,将种子倾倒在含有无菌滤纸的培养皿中。
7. 待水稍干以后,用小镊子取拟南芥种子点种到已经晾干的MS培养基平板上。
8. 用封口膜封好培养皿,写好标签。
9. 将封好的平板放到4℃的冰箱2-3d,进行春化处理,打破种子休眠期。
10. 将春化处理后的平板放入组织培养室(22℃-23℃),培养3-4d,种子即萌发。
11. 在培养室培养 7-10d,幼苗长出两片真叶以后,即可进行大量移栽。
拟南芥种子注意事项:
1. 因幼苗长出真叶后即可移栽,MS培养基的蔗糖含量控制在1%-2%即可。
2. 用70%乙醇进行种子表面消毒时,时间不宜过长,因为拟南芥种皮较薄,乙醇极易渗入,杀伤种子。
3. 点种种子时,避免种子挤到一起,防止根交错到一起。
4. 如果种子收获后超过3个月,可以不用进行春化处理。
5. 放置培养皿时,前几天可以倒置放置,当根生成后改为平放,防止根向上生长。
6. MS培养基可用B5培养基代替。
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文献和实验相关的基因,这其中主要耗时间的是五个植物(拟南芥)的生长周期(我们假定每个周期为两个月)。 作为作图过程的第一步,突变体植株将和另外一个生态型(Col-0或者Ler )的植株杂交。在大多数情况下,用于杂交的突变体植株是作为父本还是母本是没有关系的。然后播种F1代种子。在F1代植物的生长过程中,我们就有可能来对其表现型和基因型进行分析。F1代植物的表型的出现或者消失将显示着我们所研究的突变是显性的还是隐性的。最好通过对一些标记的分析来确认F1代植物是杂合体,而且在杂交过程中我们没有犯错误。当然也有必要
种子萌发袋是一种廉价的,节省空间的可用于种植植物的作为钵和类似容器的替代物。 种子种在由纸芯形成的槽中,加水或附加的营养,袋子直立放置。营养液的成分可根据需要改变。 大部分植物从种子开始都可以在种子萌发袋里生长,如果种子非常小,如烟草种子,在播种之前可以先浸湿纸芯。 种子比较大时,纸芯可在第二个穿孔处折叠成更大的槽。 种子萌发袋可在121 ℃灭菌20 min。在袋子灭菌之前可以加水或选择底物以防袋子熔接在一起,灭菌之后快速冷却
6) 用喷雾器将菌液均匀喷洒在待转化植株上,移入恒温室竖直培养。 7) 培养3到4周后,收种子。放在干燥环境存放2周。 2. 转化子的筛选 1) 筛选前一般都要消毒,先用70%乙醇浸泡2分钟,再用次氯酸钠溶液处理15分钟,在上述处理时要不停地悬浮种子,最后用无菌水洗四次。 2) 处理后的种子用Top aga均匀涂布在固体筛选培养基表面。一块150mm直径的平皿最多种1500棵。低温4度春化2到3天,移入恒温室培养。根据植物筛选抗性不同
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