双显色抗兔IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶

特别提示：包括双显色抗兔IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：双显色抗兔IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶
英文名称：Double chromogenic Immunofluorescence kit for rabbit IgG(Cy3&POD)
产品规格：1ml|2ml|5ml

本试剂盒是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。CY3 比传统上的荧光更具有亲水性，因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合，从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。CY3 在 554nm 激化，在 568-574nm 发射荧光，呈鲜红色。免疫组化双显色试剂盒采用 CY3+过氧化物酶 POD 标记的链酶亲和素（SABC-CY3+POD），用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。

试剂盒组成：

组分	规格
正常山羊血清封闭液(稀释比1:10)	1ml/2ml/5ml
生物素化山羊抗兔IgG(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-Cy3(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-POD(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml

另附有四个滴瓶可供稀释试剂用。

保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。

石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性,PBS冲洗,5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(兔IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化山羊抗兔IgG，37℃孵育30 分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加 SABC-Cy3(参考效价1:100)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。

建议：
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954，与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。