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PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm

,10张/包
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  • ¥190 - 1890
  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年08月23日
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    • 库存

      801

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      室温

    特别提示:包括PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包
    产品规格:1包

    产品规格:0.20μm 13.5cm×10cm/张 10张/包
    产品保存:室温干燥保存,一年有效。
    产品简介:该膜特别适用于凝胶电印迹后的膜上的蛋白质的测序和免疫检测,特别是对于分子量小于 20KD的蛋白质。膜与湿式和半干式电印迹系统兼容。
    注意事项:
    1.凝胶电泳后,将胶在转移缓冲液中平衡 10分钟(对于厚度大于 0.75mm的凝胶,20分钟)。
    2.将平衡的凝胶与湿膜直接接触,去除凝胶和膜之间可能形成的气泡。
    3.将膜/凝胶三明治放入电印迹装置中,根据您的具体应用进行印迹程序。
    4.为了增强膜与低分子量蛋白质的结合(<20KD),在转移缓冲液中加入 20-30%的甲醇,降低外加电流。
    5.膜转印完之后如需要染色剂染色,需要将膜用甲醇浸润 15 秒之后再染色。
    需要材料:
    1.膜切割成凝胶的尺寸
    2.甲醇润湿干膜
    3.纯水
    4.转移缓冲液:用于湿转的25mM Tris,192mM 甘*酸,pH8.3,10%甲醇或用于半干转移的48mMTris,39mM 甘*酸,pH9.2,10%甲醇
    5.将滤纸片切割成凝胶的尺寸并浸泡在转印缓冲液中至少 30 秒
    6.含有 0.5-5%(w/ v)(牛血清白蛋白,酪蛋白,脱脂奶粉)的封闭液
    7.洗涤缓冲液:含有 0.05-0.1%Tween-20的PBS或TBS
    PBS:10mM 磷酸*,pH7.2,0.9%NaCl
    TBS:10mM Tris,pH7.4,0.9%NaCl
    8.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的一抗
    9.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的酶标二抗
    使用说明:
    1.将膜置于甲醇中 15 秒。当膜潮湿时,膜将从不透明的白色变成均匀,半透明的灰色。
    2.将膜浸入水中 1-2分钟以置换甲醇。如果膜漂浮在水面上,用镊子将其推入水中,直到它被淹没。
    3.将膜浸泡在转移缓冲液中 5分钟以置换水。膜已经可以用于转印。
    免疫检测:
    1.如果印迹膜干燥,用甲醇将其再湿润 15 秒,直到它从不透明的白色变成半透明的灰色。
    2.用纯水洗1分钟。
    3.将印迹膜置于封闭缓冲液中,温和搅拌孵育1 小时。在洗涤或封闭缓冲液中制备一抗溶液。
    4.将印迹膜置于稀释的一抗溶液中,温和搅拌孵育1 小时。
    5.用洗涤缓冲液洗3-5次,每次 5分钟。在洗涤或封闭缓冲液中制备二抗溶液。
    6.将印迹膜置于稀释的二抗溶液中,温和搅拌孵育1 小时。
    7.用洗涤缓冲液洗3-5次,每次 5分钟。
    8.化学发光检测法进行显色,在显色剂中温育 1-5分钟,使印迹膜暴露于 X 射线胶片或使用化学发光成像系统。
    膜的存储:
    如果膜在蛋白质转移后不立即使用,膜可以干燥保存,而没有任何性能损失。
    1.将膜放在滤纸上,室温下晾干 1-2 小时。
    2.用保鲜膜覆盖膜,并保存在阴凉的地方。
    3.在继续使用膜之前,使用以下方法之一重新润湿膜:
    A.将膜置于 100%甲醇中,用水清洗,然后再用于后续实验。
    B.将膜直接放入至少含有 50%甲醇的染色溶液中。
    相容的染色剂:
    1.考马斯亮蓝染色剂 2.酰胺黑 3.印度墨水 4.丽春红 5.胶体金和 CPT 6.甲**(代"胺")蓝

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    • 【转帖】western blot常见问题汇编

      组化和Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。一般抗体说明书上都有注明此种抗体识别的氨基酸区间。(限于单抗)W. Western Blot 中抗体的重复应用问解答:抗体工作溶液一般不主张储存反复使用,但是如抗体比较珍贵,可反复使用2-3次。稀释后应在2-3天内使用,4度保存,避免反复冻融。4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别?解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物,价格最便宜;PVDF膜介于二者之间。就结合

    • Western Blot详解

      溶液一般不主张储存反复使用,但是如抗体比较珍贵,可反复使用2-3次。稀释后应在2-3天内使用,4度保存,避免反复冻融。4. 滤纸、胶和膜的问题V. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别?解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物,价格最便宜;PVDF膜介于二者之间。就结合能力而言:尼龙膜结合DNA和RNA能力可达480-600μg/cm2,可结合短至10bp的核酸片段;硝酸纤维素膜结合DNA和RNA能力可达80-100μg/cm2,对于200bp

    • Western Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)

      别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可同时用于免疫组化和 Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。一般抗体说明书上都有注明此种抗体识别的氨基酸区间。(限于单抗)W. Western Blot 中抗体的重复应用问题解答:抗体工作溶液一般不主张储存反复使用,但是如抗体比较珍贵,可反复使用2-3次。稀释后应在2-3天内使用,4度保存,避免反复冻融。4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别?解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种

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