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- 百奥莱博
- HR0340-UJS
- 北京
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
306
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50ml/100ml/200ml
特别提示：包括增强型ECL化学发光检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：增强型ECL化学发光检测试剂盒
产品货号：增强型ECL化学发光检测试剂盒
产品规格：50ml/100ml/200ml
免疫印迹最重要也是最后一步就是酶与底物反应进行检测，本试剂盒以化学荧光发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子。其原理是，蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上，以一抗及辣根过氧化物酶HRP标记的二抗结合膜上的目的蛋白，或以HRP标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的ECL 工作液，在可见光下室温孵育膜数分钟，将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于X 光片曝光暗盒。然后转入暗室将X 光胶片压在膜上曝光数秒到数分钟至数小时。显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在X光胶片上。也可不进行X 光胶片曝光直接对印迹膜进行荧光CCD 扫描。
储存条件：2-8℃避光保存。
有效期：一年
注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点：
1．高灵敏度
2．低背景
试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●双蒸水
使用注意事项：
● ECL 工作液配制过程中吸取试剂I和试剂II时务必跟换吸头，工作液新鲜配制后立即使用，放置过久会影响灵敏度。
● 根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。
● 曝光时间过长会使背景加深，曝光不足会导致条带模糊。
● 如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用 ECL 发光和曝光。
● 应使用高质量保鲜膜。
使用方法：
1．使用合适的方法进行Western，直至用PBST 洗涤二抗。
2．新鲜配制 ECL 工作液：试剂A和试剂B按1:1 混合后,用双蒸水10倍稀释，混合后即为ECL 工作液。须立即使用！
3．印迹膜蛋白面朝上，用 ECL 工作液均匀滴加至印迹膜室温孵育1-2分钟。ECL工作液使用量大约为0.125ml/cm2膜或根据个人实验习惯使用。
4．用平头镊夹住印迹膜，垂直置于吸水纸以吸去多余工作液。
5．快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间，尽量赶尽气泡。
6．将印迹膜蛋白面朝上，放于X光胶片暗盒内。
在暗室内放入X光片，曝光，显影。
除了增强型ECL化学发光检测试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：
WE0311 Tris-甘氨酸转膜缓冲液(pH8.3,10×) 500ml
SNM378 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer(还原，2×) 5ml
SNM404 1.5 M×Tris Buffer缓冲液(pH8.8) 500ml
SNM470 免疫组化用伊红染色液 50ml
SNM483 即用型正常山羊血清 100ml
KFS060 1×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液 1000ml
KFS075 SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 50 块胶
JN0184 荧光素酶检测试剂盒 100T
QN1181 两性电解质(pH3～10) 12ml
QN1193 氯化钠结晶紫增菌液 250G
HR0027 细胞核蛋白提取试剂盒 50T/100T
HR8010 核膜蛋白和核内蛋白提取试剂盒 50T/100T
HR8059 叶绿体蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用) 50T/100T
HR0370 SDS-PAGE电泳液(5×) 100ml/500ml
GL2937 碘乙*(代"酰")胺溶液(IAM,10mmol/L) 10ml
GL1550 通用显影液 500ml
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文献和实验Ecl 显色原理：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。 2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。 5）显影、定影。 6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）-底物化学发光 ECL 法
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交
方法也不同，常用的检测系统有化学发光检测（ECL）和化学显色 DAB 检测系统。 化学发光检测（ECL）： 利用 HRP 催化化学发光物质，生成一种不稳定的中间物质，其衰变时在暗室内形成明显的肉眼可见的化学发光带，利用 X 胶片感光 原理，将结果记录下来。 ECL 显色试剂配制：化学发光底物 A 和 B 按照 1：1 比例等体积混匀。 将混合好的显色底物覆盖印迹膜 1-5 min，黑暗条件下观察荧光效果。 在暗室可用放射自显影胶片或化学发光成像系统记录结果 。 如采用放射自显影胶片，曝光几秒
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