碱性磷酸酶（来源于大肠杆菌）

特别提示：包括碱性磷酸酶（来源于大肠杆菌）在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：碱性磷酸酶（来源于大肠杆菌）
英文名称：Alkaline Phosphatase
产品货号：YT405
产品规格：200U

本品是一种热敏感的，可以催化DNA、RNA、核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸水解释放5′或3′末端磷酸基团的酶，也可以脱去蛋白质丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上的磷酸基团。本酶是一种新型碱性磷酸酯酶，在我司的多种内切酶和PCR缓冲液中可保持100%活性，对于各种类型的DNA 5′末端的去磷酸化均可在37℃孵育10分钟即可完成，并且75℃孵育5分钟即可完全失活。

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1)，是一类水解酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白质和生物碱等，并在碱性条件下zuì为有效。该酶是一组同功酶的统称。

经限制性内切酶酶切的质粒5′端带有磷酸基团，在进行基因克隆时为避免质粒自连，可以使用本酶去除5′末端磷酸基团。脱去5′末端磷酸基团的质粒不能发生自连。

特点：快速去磷酸化，只需37℃孵育10分钟即可；快速失活，75℃孵育5分钟即可完全失活；使用方便，在各种内切酶和PCR缓冲液中保持100%活性，可以和质粒DNA的消化同时进行；操作步骤简单，对于5′或3′突出末端、平端等各种DNA的脱磷酸化采用完全相同的操作步骤；可直接用于连接反应，经本酶脱磷，并75℃孵育5分钟失活后可直接用于后续的连接反应。

用途：通过去除载体或DNA片段5′末端的磷酸基团，防止载体或DNA片段自连；质粒DNA的同时内切酶消化和脱磷；通过5′末端脱磷，为5′末端磷酸化放射性标记准备模板；去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基团；用于蛋白质丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的去磷酸化。

来源：大肠杆菌表达，表达基因为一种细菌碱性磷酸酯酶基因。

酶活性定义：37℃10分钟内，催化1μg 线性化的pUC19 DNA5′末端脱磷所需的酶量定义为一个活力单位。

纯度：不含DNA外切酶和内切酶，不含RNA酶。

酶储存溶液：20mM HEPES-NaOH(pH7.4)，1mM MgCl2，0.1mM ZnCl2，0.1% Triton X-100，50%(v/v)glycerol。

Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH8.0 at 37℃)，50mM MgCl2，1M KCl，0.2% Triton X-100，10mM 2-mercaptoethanol，1mg/ml BSA。

失活或抑制：75℃加热5分钟可以使本酶失活。金属离子螯合剂对本酶有抑制作用。

储存条件：-20℃

除了碱性磷酸酶（来源于大肠杆菌）,，我公司还供应以下相关产品：



名称：Bpu10I限制性内切酶
货号：SV0149
规格：1KU|200U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 25%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 25%
特性:
重组酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性。

名称：Hpy99I限制性内切酶
货号：SV0435
规格：500U|100U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 10%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
2,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
建议温育时间不＞4 小时。

名称：StuI限制性内切酶
货号：SV0734
规格：5KU|5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
浓度:
10,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dcm甲基化敏感。

名称：Nt.BbvCI切刻内切酶
货号：SV0799
规格：5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。

名称：核酸内切酶 V
货号：SV1118
规格：1250U|250U
特性:
切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸
切割错配
概述:
核酸内切酶 V 是在 E. coli 中发现的一种 DNA 修复酶。它识别 DNA 中的脱氧次黄嘌呤核苷，即脱氧腺苷的去氨基产物。核酸内切酶 V，也称为脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 内切酶，识别含脱氧次黄嘌呤核苷（无论配对与否）的双链或单链 DNA。也可识别含脱碱基（AP）位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flaps 和类 -Y 型结构的 DNA，但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶 V 发挥 DNA 修复功能时，还需另外一种蛋白的存在，因为它不能切除 DNA 上的脱氧次黄苷或受损碱基。
核酸内切酶 V 对错配脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 端第二个或第三个磷酸二酯键进行切割，切割第二个磷酸二酯键的效率是95%，第三个磷酸二酯键的效率是 5%，产生一个 3´ 羟基、5´ 磷酸的切刻。
来源:
重组 E. coli 菌株，携带有 Endo V 基因与编码麦芽糖结合蛋白（MBP）基因的融合基因。融合蛋白纯化后具有生物活性。该蛋白含 223 个氨基酸，分子量为 24.9 kDa。
反应条件:
1X BalbBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2 ，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
质保声明:
核酸内切酶 V 经过严格的质控检测，确保该产品具有zuì高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 10 μl反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内能够切割 1 pmol 含单脱氧次黄嘌呤核苷位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
* 脱氧次黄嘌呤核苷位点的制备:合成 34 mer 寡核苷酸双链时，在其一条链的中间掺入脱氧次黄嘌呤核苷（dI）碱基。
浓度:
10,000 units/ml。