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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名:
Goat anti-mouse IgG2a,IgG
- 宿主:
山羊
- 抗原来源:
小鼠
- 供应商:
佰泰科
- 库存:
大量
- 是否单克隆:
多克隆
- 规格:
1mg
本品为亲和纯化级羊抗小鼠IgG2a抗体,与小鼠IgG2a有特异性反应,效价测定(ELISA)>1:40万。与小鼠IgA、IgM、IgG1、IgG2b、IgG3、人IgG、兔IgG等类/亚型无交叉反应;可用于ELISA, IHC, Blot等科学研究实验。
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度>96%。
4℃可短期存放,-20℃分装可长期储存,避免反复冻融。
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
- 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
- 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或者RT封闭)封闭1小时。弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。
3. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
4. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
5. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
6. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
7. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。
同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
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文献和实验猪 免疫球蛋白G 2a(IgG2a) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中 免疫球蛋白G 2a(IgG2a) 的 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 猪 免疫球蛋白G 2a(IgG2a) 水平。用纯化的 猪IgG 2a(IgG2a) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 人 免疫球蛋白G 2a(IgG2a
ORDERING INFORMATION Catalog Number: HAF007 Lot Number: FIM06 Size: 1 mL Formulation: 0.2 μm filtered solution in PBS with stabilizers Storage: 2 - 8° C Specificity: mouse IgG1, mouse IgG2A, mouse IgG2B, mouse IgG3 heavy and light chains Immunogen
的Caspase-3及对底物多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]等的裂解。方法: 收集细胞→PBS洗涤→抽提细胞裂解液→蛋白定量→SDS-PAGE电泳→硝酸纤维素膜或PVDF膜转移→5%脱脂奶粉封闭,室温1.5~2h或4°C过夜→Caspase-3多抗或单抗室温反应1~2h或4°C过夜→TBS-T(含0.05% Tween 20的TBS)洗3次,5~10min/次→HRP-标记的羊抗鼠IgG或AP标记的羊抗鼠IgG室温反应1~2h→ TBS-T洗3次
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