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- Bio-Tc
- Ns04-05
- 洛阳
- 2026年01月18日
- 无
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- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名：
Human IgG Fc
- 宿主：
无
- 供应商：
佰泰科
- 库存：
大量
- 级别：
亲和纯
- 保质期：
3年
- 抗原来源：
无
- 是否单克隆：
多克隆
- 保存条件：
-20
- 规格：
1mg
正常人IgG经用木瓜酶分解后可断裂为三个基本相似的片段,其中二片可与抗原结合的段为Fab片段,每一片段的分子量为45,000;另一片为可以结晶的段,即Fc片段,分子量为55,000,Fc片段赋于抗体分子以生物学活性。
液体、无菌状态，溶于0.01M磷酸盐缓冲液中，PH7.4、含0.15 M氯化钠。未加防腐剂。本品为高纯度人IgG FC片段，不含人IgG分子 、IgG Fab片段。
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度＞９7％。
4℃可短期存放，-２０℃分装可长期储存，避免反复冻融。
1 . 将抗体结合到蛋白A或蛋白G微珠上。对于一般用途的层析柱，每毫升湿的微珠大约可以结合2mg单克隆抗体或亲和纯化的多克隆抗体。将抗体和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的匀浆，在总量为10ml的溶液中加入大约lml微珠，室温孵育1h，轻轻摇动混匀。
2． 用10倍体积的0.2mol／L硼酸钠（pH9.0）洗涤微珠2次，每次以3000g离心2rain或10 000g离心30s。
3． 用10倍体积的0.2mol／L硼酸钠（pH9.0）重悬微珠，留取相当于10t~l湿微珠的样品。加入足量的二甲基庚二酸酯固体至微珠匀浆中，使终浓度为20mmol／L。
4． 室温孵育30min，并轻轻混匀。留取相当于10t~l偶联微珠的样品。
5． 用0.2mol／L乙醇胺pH8.0．洗涤微珠1次以终止反应。然后重悬于0.2mol／L乙醇胺，室温孵育2h，轻轻混匀。微珠用PBS洗涤后，重悬于PBS，加入硫柳汞保存。
6． 将偶联前和偶联后的微珠样品加入Laemmli样品缓冲液中煮沸后，检查偶联效果。分别取相当于1ul和9ul 2份样品在10％SDS—聚丙烯酰胺凝胶中电泳，并用考马斯亮蓝染色，偶联效果良好时，在偶联前的微珠样品中显示一条55kDa的重链带，而偶联后的样品无此区带。
7． 将抗体包被的微珠转入合适的层析柱中，用PBS冲洗容器收集残留的微珠。如果可能，仅使用结合制品中全部抗原所需的抗体微珠基质。
8． 用20倍柱床体积与制备抗原相同的缓冲液洗柱。
9． 将抗原液加到柱上，按每毫升柱体积大约lml／h的速度使抗原溶液流过层析柱，可以用一台蠕动泵控制。
10． 用20倍柱床体积的结合缓冲液（PBS）洗柱。
11． 用20倍柱床体积的预洗脱缓冲液洗柱，建议使用预洗脱缓冲液。
12． 采用分段洗脱法，连续以0.5倍柱床体积的洗脱缓冲液通过层析柱，分管收集每一组分。如果用过高或过低pH值的缓冲液洗脱，收集管内需加入0.1倍柱床体积的缓冲液。
13． 检测每管的抗原含量，将浓度高的各管合并。根据抗原的用途，需对获得的蛋白洗脱液透析以改变缓冲液。
14． 用20倍柱床体积的起始缓冲液流经基质，使层析柱再生。加入0.01％硫柳汞可长期保存（4℃）。
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文献和实验为对兔疫球蛋白Fc部分c末端的受体。对具有该受体的细胞，通过抗体与抗原结合时，细胞将发挥如下的特有机能：（1）原噬菌体对IgG，占多形核白细胞大部分的嗜中性细胞对IgG、IgA具有Fc受体，通常通过与抗原结合的抗体以及有时与游离的抗体（嗜细胞性抗体）结合来捕捉抗原，并经吞噬作用将之围吞。（2）B细胞的大部分（80%以上）具有对IgG的Fc受体，这些都不进行产生抗体的细胞分化，可通过与抗原抗体复合体的结合而被活化，释放产生抗体的细胞限制因子。（3）T细胞约有10%具有Fc受体，主要
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层细胞高表达FcRn，可介导母体血中IgG进入胎儿血循环；通过肠上皮的FcRn，可将母体初乳中IgG转运到新生儿血循环。将人IgG通过肠道上皮细胞转运到肠腔结合相应的抗原，然后又将IgG／抗原复合物通过肠上皮细胞屏障又转运回黏膜固有层，被DC所加工，并提呈给局淋巴样组织中CD4+T细胞，表明IgG也是黏膜表面重要的免疫分子。 ②Fcα/μR，一种新的既可结合IgA又可结合IgM的Fc受体，人Fcα/μR基因与pIgR相邻。成熟Fcα/μR为单链跨膜蛋白，胞膜外区有3个结构
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