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- Bio-Tc
- Rb05-01A
- 洛阳
- 2025年12月21日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名：
Normal rabbit serum-albumin(freeze drying)
- 宿主：
无
- 抗原来源：
无
- 库存：
大量
- 供应商：
佰泰科
- 是否单克隆：
多克隆
- 规格：
1g
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度＞９7％。
4℃可短期存放，-２０℃可长期储存。
1 . 将抗体结合到蛋白A或蛋白G微珠上。对于一般用途的层析柱，每毫升湿的微珠大约可以结合2mg单克隆抗体或亲和纯化的多克隆抗体。将抗体和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的匀浆，在总量为10ml的溶液中加入大约lml微珠，室温孵育1h，轻轻摇动混匀。
2． 用10倍体积的0.2mol／L硼酸钠（pH9.0）洗涤微珠2次，每次以3000g离心2rain或10 000g离心30s。
3． 用10倍体积的0.2mol／L硼酸钠（pH9.0）重悬微珠，留取相当于10t~l湿微珠的样品。加入足量的二甲基庚二酸酯固体至微珠匀浆中，使终浓度为20mmol／L。
4． 室温孵育30min，并轻轻混匀。留取相当于10t~l偶联微珠的样品。
5． 用0.2mol／L乙醇胺pH8.0．洗涤微珠1次以终止反应。然后重悬于0.2mol／L乙醇胺，室温孵育2h，轻轻混匀。微珠用PBS洗涤后，重悬于PBS，加入硫柳汞保存。
6． 将偶联前和偶联后的微珠样品加入Laemmli样品缓冲液中煮沸后，检查偶联效果。分别取相当于1ul和9ul 2份样品在10％SDS—聚丙烯酰胺凝胶中电泳，并用考马斯亮蓝染色，偶联效果良好时，在偶联前的微珠样品中显示一条55kDa的重链带，而偶联后的样品无此区带。
7． 将抗体包被的微珠转入合适的层析柱中，用PBS冲洗容器收集残留的微珠。如果可能，仅使用结合制品中全部抗原所需的抗体微珠基质。
8． 用20倍柱床体积与制备抗原相同的缓冲液洗柱。
9． 将抗原液加到柱上，按每毫升柱体积大约lml／h的速度使抗原溶液流过层析柱，可以用一台蠕动泵控制。
10． 用20倍柱床体积的结合缓冲液（PBS）洗柱。
11． 用20倍柱床体积的预洗脱缓冲液洗柱，建议使用预洗脱缓冲液。
12． 采用分段洗脱法，连续以0.5倍柱床体积的洗脱缓冲液通过层析柱，分管收集每一组分。如果用过高或过低pH值的缓冲液洗脱，收集管内需加入0.1倍柱床体积的缓冲液。
13． 检测每管的抗原含量，将浓度高的各管合并。根据抗原的用途，需对获得的蛋白洗脱液透析以改变缓冲液。
14． 用20倍柱床体积的起始缓冲液流经基质，使层析柱再生。加入0.01％硫柳汞可长期保存（4℃）。
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文献和实验0.22 µm 过滤器），或者加入抑菌剂（例如 0.1% 叠氮化钠）以避免细菌生长。值得注意的是，并非所有蛋白质都能在 4°C 长时间保持稳定。 3. 长期保存（一周以上） 需要将蛋白样品冻存。使用液氮或者干冰/乙醇混合物将其快速冷冻避免蛋白质变性。可以将样品分装至多个管子中，来避免反复冻融可能造成的活性降低或影响结构。 可以添加几种稳定剂，如甘油（5 - 50%（w / v）），血清白蛋白（10 mg / ml），还原剂（例如 1 mM DTT）和配体（其性质和浓度取决于靶蛋白的性质和浓度
很多，如果说指的是鸡蛋的“蛋清”的话，那基本就是一个蛋白质的水溶液吧，煮熟只是蛋白质变性了，凝固了。（没做过实验，估计拿来冻干的话，应该也能拿到粉末吧:)） 但是很多蛋白质也被简称为“蛋白”，比如，牛血清白蛋白、大豆蛋白粉、免疫球蛋白等等。 orgachem 哦，谢谢楼上的！ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
等。 6、 金标级牛血清白蛋白，高纯度，纯度99%以上。 作用：制作金标抗体等。 7、 交联牛血清白蛋白：冷冻干燥粉末，含单体(66000)、二聚体(132000)、三聚体(198000)、四聚体(264000)等。 作用： 测定未知蛋白质的分子量，也可用于生化教学实验，用以摸索电泳条件、检定电泳结果等。 wako货号为：010-15094的结晶体牛血清蛋白，这是纯度最高的BSA，可以做标准品使用。
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