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分泌型人IgA (二聚体)

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  • Bio-Tc
  • Ns04-12
  • 洛阳
  • 2025年12月27日
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    • 抗体英文名

      Human SIgA

    • 宿主

    • 保质期

      3年

    • 抗原来源

    • 供应商

      佰泰科

    • 库存

      大量

    • 是否单克隆

      多克隆

    • 保存条件

      -20

    • 规格

      1mg

    分泌型IgA(sIgA)为双聚体,沉降系数11S,分子量400kD。每一sIgA分子含一个J链和一个分泌片。α链、L链和J链均由浆细胞产生,而分泌片由上皮细胞合成。J链通过倒数第二位二硫键将2个IgA单体互相连接;结合分泌片后sIgA的结构更为紧密而不被酶解,有助于sIgA粘附于粘膜表面及外分泌液中以保持抗体活性。外分泌液中的高浓度IgA主要为局部合成,特别是在肠道相关淋巴样组织中。
    收集正常人初乳通过亲和层析纯化,经低温无菌过滤制成。
    IgA(双体)纯品于0.01M PH7.4PBS,不含任何防腐剂,请避免微生物污染。
    用于免疫组化化学、ELISACLIA等。
    聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度>98%。
    -20℃(避免反复冻融)
    1 . 将抗体结合到蛋白A或蛋白G微珠上。对于一般用途的层析柱,每毫升湿的微珠大约可以结合2mg单克隆抗体或亲和纯化的多克隆抗体。将抗体和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的匀浆,在总量为10ml的溶液中加入大约lml微珠,室温孵育1h,轻轻摇动混匀。

    2. 用10倍体积的0.2mol/L硼酸钠(pH9.0)洗涤微珠2次,每次以3000g离心2rain或10 000g离心30s。

    3. 用10倍体积的0.2mol/L硼酸钠(pH9.0)重悬微珠,留取相当于10t~l湿微珠的样品。加入足量的二甲基庚二酸酯固体至微珠匀浆中,使终浓度为20mmol/L。
    4. 室温孵育30min,并轻轻混匀。留取相当于10t~l偶联微珠的样品。

    5. 用0.2mol/L乙醇胺pH8.0.洗涤微珠1次以终止反应。然后重悬于0.2mol/L乙醇胺,室温孵育2h,轻轻混匀。微珠用PBS洗涤后,重悬于PBS,加入硫柳汞保存。

    6. 将偶联前和偶联后的微珠样品加入Laemmli样品缓冲液中煮沸后,检查偶联效果。分别取相当于1ul和9ul 2份样品在10%SDS—聚丙烯酰胺凝胶中电泳,并用考马斯亮蓝染色,偶联效果良好时,在偶联前的微珠样品中显示一条55kDa的重链带,而偶联后的样品无此区带。

    7. 将抗体包被的微珠转入合适的层析柱中,用PBS冲洗容器收集残留的微珠。如果可能,仅使用结合制品中全部抗原所需的抗体微珠基质。

    8. 用20倍柱床体积与制备抗原相同的缓冲液洗柱。

    9. 将抗原液加到柱上,按每毫升柱体积大约lml/h的速度使抗原溶液流过层析柱,可以用一台蠕动泵控制。

    10. 用20倍柱床体积的结合缓冲液(PBS)洗柱。

    11. 用20倍柱床体积的预洗脱缓冲液洗柱,建议使用预洗脱缓冲液。

    12. 采用分段洗脱法,连续以0.5倍柱床体积的洗脱缓冲液通过层析柱,分管收集每一组分。如果用过高或过低pH值的缓冲液洗脱,收集管内需加入0.1倍柱床体积的缓冲液。

    13. 检测每管的抗原含量,将浓度高的各管合并。根据抗原的用途,需对获得的蛋白洗脱液透析以改变缓冲液。

    14. 用20倍柱床体积的起始缓冲液流经基质,使层析柱再生。加入0.01%硫柳汞可长期保存(4℃)。

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    • 5 种常见方法 解决引物二聚体

      首先,最好在引物设计阶段就采取简单的预防措施,从一开始即避免二聚体的形成。有几款免费工具可协助完成上述过程。其中一种工具是 AutoDimer,它可以从理论上对引物对的序列进行分析,并标记出那些易形成二聚体的序列。 其次,如果出现了引物二聚体,有许多方法可以减少或消除反应中的引物二聚体。如下:

    • 分泌型secretor

      ABO型的血型物质,如同血液一样,有的个体可分泌在唾液、精液、胃液等分泌物中,有的个体则几乎不分泌,前者称为分泌型(Se)型,后者称为非分泌型(se)型。两者的出现率约为8∶2,在每一个体不变,服从于孟德尔定律,而Se型基因为显性遗传,se型基因为隐性遗传,Se型和se型的差异可作为血型来看待,故特称为Se型血型。此血型与其他血型一样,不仅在法医学上可用于个人鉴别和推测遗传关系,而且在临床上还可以根据分泌物的Se型来推测血型,所以被广泛应用。决定Se、se血型,需要比较红细胞和分泌

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