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- 抗体英文名:
Human SIgA
- 宿主:
无
- 保质期:
3年
- 抗原来源:
无
- 供应商:
佰泰科
- 库存:
大量
- 是否单克隆:
多克隆
- 保存条件:
-20
- 规格:
1mg
收集正常人初乳通过亲和层析纯化,经低温无菌过滤制成。
人IgA(双体)纯品于0.01M PH7.4PBS中,不含任何防腐剂,请避免微生物污染。
用于免疫组化化学、ELISA、CLIA等。
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度>98%。
-20℃(避免反复冻融)
1 . 将抗体结合到蛋白A或蛋白G微珠上。对于一般用途的层析柱,每毫升湿的微珠大约可以结合2mg单克隆抗体或亲和纯化的多克隆抗体。将抗体和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的匀浆,在总量为10ml的溶液中加入大约lml微珠,室温孵育1h,轻轻摇动混匀。
2. 用10倍体积的0.2mol/L硼酸钠(pH9.0)洗涤微珠2次,每次以3000g离心2rain或10 000g离心30s。
3. 用10倍体积的0.2mol/L硼酸钠(pH9.0)重悬微珠,留取相当于10t~l湿微珠的样品。加入足量的二甲基庚二酸酯固体至微珠匀浆中,使终浓度为20mmol/L。
4. 室温孵育30min,并轻轻混匀。留取相当于10t~l偶联微珠的样品。
5. 用0.2mol/L乙醇胺pH8.0.洗涤微珠1次以终止反应。然后重悬于0.2mol/L乙醇胺,室温孵育2h,轻轻混匀。微珠用PBS洗涤后,重悬于PBS,加入硫柳汞保存。
6. 将偶联前和偶联后的微珠样品加入Laemmli样品缓冲液中煮沸后,检查偶联效果。分别取相当于1ul和9ul 2份样品在10%SDS—聚丙烯酰胺凝胶中电泳,并用考马斯亮蓝染色,偶联效果良好时,在偶联前的微珠样品中显示一条55kDa的重链带,而偶联后的样品无此区带。
7. 将抗体包被的微珠转入合适的层析柱中,用PBS冲洗容器收集残留的微珠。如果可能,仅使用结合制品中全部抗原所需的抗体微珠基质。
8. 用20倍柱床体积与制备抗原相同的缓冲液洗柱。
9. 将抗原液加到柱上,按每毫升柱体积大约lml/h的速度使抗原溶液流过层析柱,可以用一台蠕动泵控制。
10. 用20倍柱床体积的结合缓冲液(PBS)洗柱。
11. 用20倍柱床体积的预洗脱缓冲液洗柱,建议使用预洗脱缓冲液。
12. 采用分段洗脱法,连续以0.5倍柱床体积的洗脱缓冲液通过层析柱,分管收集每一组分。如果用过高或过低pH值的缓冲液洗脱,收集管内需加入0.1倍柱床体积的缓冲液。
13. 检测每管的抗原含量,将浓度高的各管合并。根据抗原的用途,需对获得的蛋白洗脱液透析以改变缓冲液。
14. 用20倍柱床体积的起始缓冲液流经基质,使层析柱再生。加入0.01%硫柳汞可长期保存(4℃)。
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文献和实验首先,最好在引物设计阶段就采取简单的预防措施,从一开始即避免二聚体的形成。有几款免费工具可协助完成上述过程。其中一种工具是 AutoDimer,它可以从理论上对引物对的序列进行分析,并标记出那些易形成二聚体的序列。 其次,如果出现了引物二聚体,有许多方法可以减少或消除反应中的引物二聚体。如下:
ABO型的血型物质,如同血液一样,有的个体可分泌在唾液、精液、胃液等分泌物中,有的个体则几乎不分泌,前者称为分泌型(Se)型,后者称为非分泌型(se)型。两者的出现率约为8∶2,在每一个体不变,服从于孟德尔定律,而Se型基因为显性遗传,se型基因为隐性遗传,Se型和se型的差异可作为血型来看待,故特称为Se型血型。此血型与其他血型一样,不仅在法医学上可用于个人鉴别和推测遗传关系,而且在临床上还可以根据分泌物的Se型来推测血型,所以被广泛应用。决定Se、se血型,需要比较红细胞和分泌
AB0分泌型是检验主管技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。 AB0分泌型:ABH抗原不仅存在于红细胞膜上,也可存在于白细胞、血小板及其他组织细胞上。ABH血型特异物质存在于唾液(含量最丰富)、尿、泪液、胃液、胆汁、羊水、血清、精液、汗液、乳汁等体液中,但不存在于脑脊液。这些可溶性抗原又被称为“血型物质”。凡体液中有血型物质者为分泌型(可以中和或抑制抗体与具有相应抗原的红细胞发生凝集),无血型物质者为非分泌型。 血型物质意义:①测定唾液血型
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