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- 2026年04月13日
- 小鼠
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名：
Mouse anti-human AFP
- 宿主：
小鼠
- 库存：
大量
- 抗原来源：
人
- 保质期：
3年
- 供应商：
佰泰科
- 级别：
亲和纯
- 标记物：
HRP
- 是否单克隆：
多克隆
- 保存条件：
-20
- 规格：
1mg
| Mab mouse×human |
提纯实验
1．材料
单克隆抗体制备流程
(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
20mMol/LNaCl
(2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
40mMol/LNaCl
(3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
80mMol/LNaCl
(4)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
(5)饱和硫酸铵液
(6)DEAE—纤维素柱
2．操作方法
（1）小鼠腹水用冷PBS液稀释4倍后，于1.00×105转离心30min，去沉淀。
（2）在4℃于上清中缓缓滴加饱和硫酸铵液，边加边搅拌，使溶液最终为50%硫酸铵浓度。
（3）此溶液置冰中30min~60min，然后5000r/min离心10min，去上清。
（4）将沉淀溶于Tris－HCl缓冲液（40mMol/LNaCl）中（溶液可能混浊）。
（5）装入透析袋于Tris－HCl缓冲液（20mMol/LNaCl）中透析除盐。
（6）离心去沉淀。
单克隆抗体制备流程
（7）溶液稀释（1:100或更高倍稀释）后，于280nm测蛋白含量，估计蛋白质含量1A280unit=0.8mg蛋白质一般每ml腹水中，含有总蛋白约25mg~36mg。
（8）过DEAE—纤维素柱：纤维素柱高40cm，以20mMol/LNaClTris缓冲液平衡。透析样品以Tris缓冲液等量稀释。
样品进入柱床速度为1ml~2ml/min，以NaCl线形梯度洗脱。大部分单克隆IgG于40mMol/L和80mMol/LNaCl洗脱，也有极少例外的单克隆抗体于120mMol/L~150mMol/LNaCl洗脱。测OD280nm收集蛋白峰，单克隆IgG保存备用。
杂交瘤产生各种免疫球蛋白，但主要是IgG和IgM，究竟是哪种为主，则决定于抗原的免疫程序。免疫一次，且3天后就取脾，多为产生IgM的B淋巴细胞。免疫多次的多为IgG。
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文献和实验【求助】AFP甲胎蛋白的受体作用机理以及如何证明体内存在其受体
月亮欣 AFP甲胎蛋白的受体作用机理以及如何证明体内存在其受体 最近复习时，遇到的一个历年考题，请各位高手帮助解答，万分感谢！ 月亮欣 自己顶啊 月亮欣 没有人帮忙啊，有专家吗，恳请解答！ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
人 甲胎蛋白（ AFP ） 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中 甲胎蛋白（AFP ） 的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 甲胎蛋白（ AFP ） 水平。用纯化的人 甲胎蛋白（ AFP ） 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 甲胎蛋白（ AFP ） ，再与 HRP 标记的 甲胎蛋白（ AFP ） 抗体结合，形成抗体 - 抗原
北京大学和海南医学院联合对肝癌细胞特异性标志物甲胎蛋白（AFP）进行长时间的研究，发现AFP具有抑制PTEN的生物学功能，导致肝癌细胞耐受全反式维甲酸诱导的凋亡，这是AFP新功能的发现。近日以题为“Alpha-fetoprotein: a new member of intracellular signal molecules in regulation of the PI3K/AKT signaling in human hepatoma
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