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- 保存条件:
常温避光
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长期
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9999
- 供应商:
上海圻明生物
- 规格:
g
产品仅供科研,不用于临床。
MTT溶液的配制方法
通常,此法中的MTT 浓度为5mg/ml。因此,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。实验的时候我一般关闭超净台上的日光灯来避光,觉得这样比较好。 需要注意的是,MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。
MTT一般最好现用现配,过滤后4ºC避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里,用的时候现配,直接往培养板中加,没必要一下子配那么多,尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。
MTT有致癌性,用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感;往96孔板加时不避光也没有关系,毕竟时间较短,或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.
配制MTT时用PBS(ph=7.4)溶解。PBS配方:Nacl 8g + Kcl 0.2g + Na2HPO4 1.44g + KH2PO4 0.24g调pH 7.4,定容1L。
普通MTT法实验步骤:
1:接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul.
2: 培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
3:呈色:培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS配制,pH=7.4)20ul.继续孵育4 h,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10min,使结晶物充分融解。
4:比色:选择490nm波长,在酶标仪上测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
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文献和实验东华帝君 原料量占比教大70%以上,粘合剂HPC,8-10%,崩解剂羧甲淀粉钠和交联羧甲基纤维素钠,其他微晶。两种崩解剂内外加各种比例都尝试了,就0.1M盐酸不崩,其他介质中崩解剂任意常规比例都没问题。原料药在0.1M中溶解度极大。大家有什么建议。 philfly 最可能是HPC,你可以换个粘合剂,或者用量降很低试一试。如果换粘合剂或者用量降很低崩解没问题,那你就懂了 q729056300
0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10)
pH 0.2mol/L Tris(ml) 0.2mol/L HCl(ml) H2 O
【求助】着急,不知道10mmol/L的Tris-HCl(pH8.0)如何配制?
ilovelc999 很着急,不知道10mmol/L的Tris-HCl(pH8.0)如何配制?有哪位知道吗?麻烦告诉我一下好吗。 mybbff 先配成10mM的,水先不要加足,调节pH到8.0后再定容到预定体积。 ilovelc999 恩,知道啦,多谢版主! wangbingying66 1.称取1.211g Tris 2.加800ml去离子
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